单组份TMB(TMB ONE PLUS)
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产品详情
产品属性
文献和实验
产品简介: 辣根过氧化物酶(HRP)底物,在HRP催化下产生可溶性蓝色,可在酶标仪370nm或者655nm读数,通过酸性物终止显色后产物变为黄色,可以在450nm读取数值,该产品主要用于微孔板ELISA实验。
产品介绍
TMB是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应,且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的、深蓝色沉淀物,这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团。同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反应进行。TMB主要应用于酶联免疫吸附实验(ELISA),经典的方法是采用AB液分开配制,使用前再混合的方法,TMB单组分显色液,采用独特的配方,一种组分就可以显色,并且长期存放稳定。可在离心管中直接取100 μl稀释过的酶标二抗,再加入100 μl此显色液,混合后进行验证。
本产品特点
1)即用型:无需混合,方便快捷,减少误差;
2)灵敏度高:不低于AB液;
3)稳定性好:2-8°C保存,有效期不低于24个月,显色终止后读数稳定;
4)背景低:底物溶液在630 nm检测时检测OD值小于0.045;
5)质量可靠:产品批间差小。
保存条件
2-8°C干燥避光保存, 24个月有效。
使用说明
1) 准备:用适当的干净容器(用纯净水反复冲洗),倒出适量的单组分TMB显色液,待达到室温后即可使用。
2) 加液:加完HRP结合物并温育一定时间后,洗板3-5次,每孔加TMB显色液100 μl。 根据个人实验需要,在室温(15-25°C)或37°C下温育10-30 min。
3) 终止:加等体积的1M盐酸或硫酸溶液终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。
4) 读数:终止反应后30 min内在450 nm处读数。
注意事项
1) 如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。
2) 为了避免产生沉淀,可在终止后马上读数,或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物。
*本试剂仅供实验室研究使用
品牌:Frdbio
货号:ELS0010