近日，上海市为促进创新产品的市场化、产业化，强化高端产业引领功能，推动研发活动产业化，全力打响“上海制造”品牌，支撑上海产业高质量发展，发起了2023年度《上海市创新产品推荐目录》编制申报工作，翌圣生物CUT&Tag试剂盒有幸入选。

 

图：《2023年度上海市创新产品推荐目录》公示截图

  CUT&Tag技术，是研究DNA-蛋白质互作的新兴技术。作为表观组学研究核心技术之一，它研究的染色质动态图谱变化目前最接近活体内变化。

 

图：CUT&Tag实验流程图

 

在CUT&Tag试剂盒转化过程中，翌圣生物开创性的在试剂盒中引入spike in，该技术已申请相关专利。

 

图：翌圣生物CUT&Tag技术申请专利

 

在CUT&Tag技术上，翌圣不断突破创新，2023年4月，翌圣推出Multi-CUT&Tag试剂盒，实现一份细胞，两个靶标的研究。在节省样本的同时，也节省时间和试剂。

 

图：Multi-CUT&Tag实验流程

 

 

众多荣誉加身，翌圣CUT&Tag试剂盒也不负所望在多领域应用开花。

 

      CUT&Tag在植物中的应用

大豆与根瘤菌共生形成高效共生固氮体——根瘤，为大豆生长发育及籽粒蛋白含量提供约65%得氮素来源，但是根瘤衰老会影响固氮终止从而影响大豆的生长发育，目前，根瘤衰老机制尚未被解析。作者利用CUT&Tag技术结合RNA-seq解析了根瘤衰老调控机制，建立了NAC-CYP分子模块调控大豆根瘤衰老的模型也为大豆氮素高效吸收提供关键理论依据。

图：CUT&Tag-qPCR验证大豆根瘤中，NAC039直接靶向半胱氨酸蛋白酶（CYP）基因

（XX. Yu et al. Plant Cell. 2023）

 

      CUT&Tag技术在鸡育种中的应用

环状RNA（circRNA）是RNA大分子的一个亚类，据报道参与骨骼肌发育的调节。然而，circRNA在鸡肌肉发生中的功能和调节机制仍不清楚。作者鉴定了一种新的circRNA靶标分子circGPD2，并通过各种湿实验和CUT&Tag实验验证circGPD2对成肌细胞的增殖和分化具有积极作用：circGPD2通过解除miR-203a对c-JUN和MEF2C抑制作用来发挥功能，此外，生肌调节因子MyoG通过靶向GPD2启动子上的E-box元件增强circGPD2的表达。

 

图：CUT&Tag-qPCR结果表明在鸡成肌细胞中，MyoG可以与P4启动子区域的E-box 1结合

（X. Shen et al. Int J Biol Macromol.2022）

 

     

CUT&Tag技术在小鼠胚胎干细胞中的应用

通过DNA-蛋白互作、RNA-DNA互作、RNA-蛋白质互作等技术，探索发育信号传导中的调控机制：Nodal 诱导的 lncRNA-Smad7 通过抑制小鼠胚胎干细胞 (mESC) 中的 BMP 信号传导来调节细胞命运决定，lncRNA-Smad7 拮抗 mESC 中的 BMP 信号传导，并类似地调节 C2C12 小鼠成肌细胞中骨细胞和肌细胞形成之间的细胞命运决定。此外，lncRNA-Smad7 与 mESC 中的 hnRNPK 结合，并且 hnRNPK 与 Bmp2 启动子结合，可能有助于 Bmp2 表达抑制。

 

图：CUT&Tag结果显示LncRNA-Smad7 KD导致Bmp2启动子区域的H3K27me3修饰减少，而LncRNA-Smad7与hnRNPK相互作用。

（XH. Kong et al. Nucleic Acids Res. 2022）

 

     

CUT&Tag技术在癌症免疫调控中的应用

人们发现 Notch-RBPJ（免疫球蛋白 kappa J 区重组信号结合蛋白）信号通路的失调与包括癌症在内的多种人类疾病有关，然而，这一关键信号通路如何通过其相互作用子和修饰进行微调仍然很大程度上未知。在该研究中，作者鉴定出RBPJ 相互作用子FBXO42，FBXO42促进RBPJ多泛素化，增强RBPJ与染色质重塑复合物的关联并诱导整体染色质松弛。

 

图：FBXO42敲除后的细胞中的染色质免疫调控图谱

（H. Jiang et al. Sci Adv. 2022）

 

     

CUT&Tag技术在生殖细胞中的应用

近年来的研究表明，SRCAP染色质重塑复合体的亚基锌指hit - 1 (Znhit1)在染色质结构调控中起着重要作用。该研究中，作者报道了雄性小鼠的种系条件缺失Znhit1特异性地阻止减数分裂起始。作者发现Znhit1是减数分裂前期事件所必需的，包括突触，DNA双链断裂形成和减数分裂DNA复制。机制上，Znhit1控制组蛋白变体H2A.Z沉积有利于减数分裂基因如减数分裂蛋白的表达，但不利于Stra8的表达。Znhit1缺乏会破坏减数分裂基因的转录泡。研究结果确定了znhit1依赖性H2A.Z沉积允许激活减数分裂基因表达，从而控制减数分裂的开始。

 

图：CUT&Tag技术表明znhit1依赖的H2A.Z掺入与转录激活因子Stra8共定位

（Sun et al. Developmental Cell. 2022）

 

 

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产品名称	货号	规格
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Hieff NGS® Multi-CUT&Tag Library Prep Kit for Illumina®多靶标CUT&Tag试剂盒	12592ES24/96	12 T/ 48 T