随着基因工程技术的发展以及基因编辑技术的成熟，越来越多的科研人员使用基因编辑的小鼠模型来研究基因表达、遗传疾病以及临床实验前的药效测试等。然而，在一些研究中，科研人员只需要对某一时期针对某一特定基因进行研究，它需要满足可以在特定组织或特定生命周期中目的基因表达的条件，而这种条件性小鼠模型叫做 Cre 工具鼠。

Cre 鼠的构建最有效的方法之一是通过 Cre-Loxp 重组酶系统实现的，特定的 Cre 工具鼠可以在某组织特异性基因启动子调控下表达组织特异性 Cre 重组酶。

想了解 Cre 工具鼠，首先需要知道 Cre-Loxp 系统是什么，我们来详细了解一下吧！

Cre-loxp 重组系统
Cre-loxp 重组酶系统，由 Cre 重组酶和 loxp 位点两部分组成。具体实现方式是通过对一段特定的 DNA 序列进行定位并且利用 Cre 重组酶对其剪接，运用该系统可针对特定细胞或组织进行「基因改造」。

Cre-loxp 重组酶系统的作用方式
Cre 重组酶识别 loxP 位点两端的反向重复序列并结合形成二聚体，然后此二聚体与另一个 loxP 位点上的二聚体结合形成一个四聚体。LoxP 位点是有方向性的，四聚体连接的两个位点在方向上是平行的。然后两个 loxP 位点间的 DNA 序列被 Cre 重组酶切断。接着，DNA 连接酶快速高效地将这些链连接起来。重组的结果取决于 loxP 位点的位置和方向。

Cre 工具鼠的构建
目前有四种常见 Cre 鼠的构建策略，每种方法各有其优点和不足，选择哪种方法根据科研目的和实际情况而定，下面为大家简单介绍下这几种模型。

质粒表达载体 Cre 鼠模型：通过受精卵原核注射的方法，获得 Cre 随机插入基因组的转基因小鼠。

定点敲入 Cre 鼠模型：利用 CRISPR/Cas 技术将 Cre 基因定点敲入相关内源基因位点，依靠内源性基因调控序列确定 Cre 表达特征。

BAC 转基因 Cre 鼠模型：将 Cre 基因先敲入至 BAC 克隆的特定基因调控元件序列后，构建 BAC 克隆载体，并将此 BAC 载体进行受精卵原核注射法，构建 BAC 转基因 Cre 小鼠模型。虽然该转基因技术也是随机整合插入，但其具有降低了质粒 DNA 随机插入引起的位置效应影响，避免了 Cre 基因 5』端敲入可能引起的杂合缺失有表型等方面的优势。

安全位点敲入 Cre 小鼠模型：目前的 Cre 小鼠模型构建策略。为了避免基因随机插入可能导致诸多不利因素影响（比如表达位置影响作用及插入突变等），通过将 Cre 定点敲入到所谓的「安全」 位点，比如 Rosa26、Hprt 和 Hipp 11 等位点。其中以 Rosa26 位点最为常用。

Cre 工具鼠的种类及应用
Cre 工具鼠主要分为 3 类：全身性 Cre、组织特异性 Cre 和配体或药物诱导 Cre。

全身性 Cre：通过诱导剂来调节驱动 Cre 重组酶的启动子活性。例如 CAG/CMV-cre 等

组织特异性 Cre：由组织特异性启动子表达，一般需要两种转基因小鼠交配使用。例如 Alb-Cre、Lyz2-Cre 等。

配体或药物诱导 Cre：通过将 Cre 重组酶与激素受体的配体结合域（ligand-bindingdomain，LBD）相融合，形成定位于胞浆的融合蛋白，只有在激素诱导后，融合的 Cre 蛋白才会通过构象变化从锚定蛋白 HSP90 上解离下来，进入细胞核，识别 loxP 位点并发生重组。例如：雌激素诱导型。