“我要送的样品比较特殊，但是想要做蛋白组学，怎么处理可以进行抽提实验？”“做LC-MSMS蛋白鉴定，磁珠样本寄样需不需要干冰保证低温环境？”想必各位伙伴们都在工作、实验中遇到过这样的问题，现在就让实验室里专业的前处理人员来帮我们回答这些问题吧~首先，寄样需不需要提供冷冻环境，答案是肯定的，蛋白质组学的样本在低温的环境中不易变性，在抽提实验中蛋白的得率就会更高，所以小伙伴们蛋白寄样基本都是需要加上干冰的哦。一般加干冰的量我们按照每天5kg来进行递增计算，本地送样推荐10kg，偏远地区需要20kg。型样本的送样指南，包教包会哦！
接下来我们来了解一下针对不同类~
一、动物篇lumingbio
动物组织的样本蛋白量相对较高，送样量的要求也相对比较宽松，一般提供50~100mg的量即可。此外，组织上有血迹、脂肪、结缔组织的还需要用PBS和组织剪将其清理干净。送样前将样品用液氮速冻5min，放置在-80℃保存，送样时需要置于干冰环境中运输。
动物的悬浮培养细胞也是比较热门的蛋白组学研究对象，如果想做细胞的蛋白组学，起码需要1×107个细胞，离心后收集，置于-80摄氏度环境中。
二、植物篇lumingbio
植物相较于动物，蛋白占比不高，所以送样在量上面的要求会多一些，推荐送500mg以上的量可以确保实验能够提取到充足的蛋白。如果是种仁、豆类等蛋白含量比较高的，200mg足以完成抽提。
处理样本需要用PBS将样本表面的泥土等杂质冲洗干净，去除掉多余的组织。好能够保证样本的形态和纯度，不推荐用锡纸包裹，放在EP管中使其形态完整为佳。用液氮急速冷冻5min后置于-80℃环境中保存，送样时需要添加干冰。
三、微生物篇lumingbio
微生物比较常规的类型包括细菌和真菌。一般来说1×108个或200mg的样本量可以保证实验顺利进行。
细菌
细菌的收集方法是通过离心弃上清，收集沉淀后用PBS冲洗数次后，用液氮冷却，置于-80℃储藏。
真菌
真菌一般都是以菌株形态存在，不需要溶液介质，所以用PBS洗净后即可放入管中。同样的冷处理处理方式后，干冰寄样。
四、液体篇lumingbio
液体样本一般有血清血浆、细胞上清、发酵液、脑脊液等，具体的处理方式这里直接上图给伙伴们参考。
01血清
1)使用真空采血管收集血液，轻轻地上下颠倒混匀5~6次。
2)4℃ 静置30-60min,让全血凝集；
3)4℃1500-2000×g离心10min,取上清；
4)用移液器将上层淡黄色血清转移到离心管中，加入蛋白酶抑制剂，混匀，瞬时离心；
5）液氮速冻5min，保存于-80℃。
02血浆
1)使用EDTA抗凝管采集全血，颠倒混匀8~10次，4℃1500-2000×g离心10min,取上清；
2)用移液器将血浆转移到离心管中，加入蛋白酶抑制剂，混匀，瞬时离心；
3)液氮速冻5min,保存于-80℃。
03细胞上清液
1)在收集前改用不完全培养基培养，即用不加血清的培养基进行培养。
2)待细胞铺满80%左右，用移液枪吸取上清。
3)4℃，6000rpm离心5min,弃去底部可能出现的固体沉淀。
4）液氮速冻5min,冻存在-80℃，干冰寄送。
04脑脊液关节液
1000g-2000×g离心5min,使用0.22um，滤膜过滤，取上清，液氮速冻5min,-80℃保存，干冰寄送。
05发酵液
10000 rpm-20000 rpm 离心 30-60 min,(或使用0.22um滤膜过滤）,取上清；液氮速冻5min,冻存在-80℃。
五、PCT样品/石蜡样本、动物篇lumingbio
微量样本(1mg左右)一般是会作为PCT样品进行寄送，除石蜡切片不需要干冰寄样外，其余组织等样品还是需要干冰提供送样低温环境。在数量上的要求一般细胞需要50-100万个细胞以上，穿刺样本等组织需要1-2mg，石蜡切片则需10 µm的石蜡切片10片/样（≥1 mg）。
六、LC-MSMS篇lumingbio
LC-MSMS主要功能是蛋白鉴定，目前我们接收的样本有SDS-PAGE胶条和蛋白磁珠样本。
SDS-PAGE胶条建议大家使用考马斯亮蓝染色（条带清晰，无降解），用EP管装好，不用加任何保存液，用冰袋寄送即可，颜色非常浅的条带可取多个重复样本放一起。胶条只需要常温保存，运输需要放在冰袋环境中即可。
蛋白磁珠样本不建议加loading buffer后100度加热，直接将连着磁珠的蛋白溶液用干冰寄送就好。送样形式也是采用-80 度冻存，干冰运输。
文末看点本篇文章内容就在此告一段落啦，如果想要了解更多咨询
最后给大家附一个全类型样本送样要求的表格，愿小伙伴们在科研路上硕果累累，早日成为学术大佬！干货满满拿走不谢~
鹿明生物也在后基因组时代的多组学浪潮中，针对我们已有的蛋白组技术、代谢组技术不断地迭代升级，组合创新，希望以好的技术为科学家们服务，为生命科学研究助力。欢迎咨询鹿明生物新技术及新福利活动吧！
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