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细胞培养总出问题,可能这几点没有做到位

2020-08-20 09:54

细胞生物学、分子生物学以及免疫学是现代三大前沿生物科学,发展异常迅速。细胞培养是细胞生物学研究中最常用的方法之一。由于在体外培养中和机体内,细胞行为的基本规律是一样的,因此许多研究可以在体外进行。更重要的是,在培养条件下,人们可以有目的的、有选择地控制细胞生长的环境,因此可以研究在某些特殊条件下的细胞生物学行为。

细胞培养的基本条件

1)仪器和设备:JET BIOFIL 二氧化碳培养箱(意大利进口)、JET BIOFIL 培养瓶(培养板、培养皿等系列细胞培养耗材可供选择)、JET BIOFIL 超净台、JET BIOFIL 纯水设备、干燥除菌设备、低温冰箱等。

 
 

2)JET BIOFIL 培养液:RPMI1640、MEN、DMEM、等,可根据根据培养需求合理选择。
 

3)JET BIOFIL 血清:一般常用为小牛血清(包括胎牛血清),人血清和其它动物血清, 血清的生物效应早已证明,它含有多种促细胞生长因子促贴附因子及其它活性物质等。不仅能促进细胞增长且能帮助细胞贴壁。由于不同的研究目的,血清成分往往干扰研究实验,如进行药物和受体及营养等方面的研究时,需要使用无血清培养基。

4)其它添加成分:可选用 JET BIOFIL 的 HEPES 等。


细胞培养中应注意的几个问题

1)培养液和培养物:一定浓度的培养液仅能支持一定数量的细胞生长,不能盲目增加每单位体积的细胞浓度

2)PH1∶7.2-7.4 >7.6 或 <6.0 细胞损伤、退变或死亡

3)培养瓶内的空间:一般培养瓶内培养液与液面上的空间体积之比为 1:10

4)容积、深度、表面面积:培养液体积与表面面积的比例为 0.2-0.5 ml/cm

5)去除死细胞

6)温度控制:动物细胞培养对温度波动较为敏感。温度低于 36.5℃,细胞生长级慢,高于 38℃,细胞失去活力

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