双抗原夹心法的反应模式与双抗体夹心法类似。用特异性抗原进行包被和制备酶结合物，以检测相应的抗体。与间接法测抗体的不同之处为以酶标抗原代替酶标抗抗体。此法中受检标本不需稀释，可直接用于测定，因此其敏感度相对高于间接法。乙肝标志物中抗HBs的检测常采用本法。本法关键在于酶标抗原的制备，应根据抗原结构的不同，寻找合适的标记方法。

双抗原夹心法的简要操作步骤为：
1）先加入抗原，使抗体固定结合于载体表面；
2）再加样品，使目标检测抗体形成抗原-抗体复合物；     美洲四棱线虫PCR试剂盒
3）加酶标抗原；
4）加入酶促反应底物，发生显色反应，显色的深浅与待测抗体的量成正比。