科学家开发出超快CRISPR技术-源井生物_企业动态

美国约翰霍普金斯大学Taekjip Ha、Bin Wu等研究人员合作开发出超快CRISPR技术。该项研究成果发表在2020年6月12日出版的《科学》杂志上。

研究人员开发了一种笼状的RNA策略，该策略能够让Cas9结合DNA，但在光诱导的激活作用下才能剪切。这种方法被称为超快CRISPR（vfCRISPR），可在亚微米和秒级产生双链断裂（DSB）。同步切割改善了对DNA修复的动力学分析，揭示了细胞在几分钟内对Cas9诱导的DSB作出反应，并且在DNA连接后可以保留MRE11。DNA损伤后H2AX的磷酸化每分钟传播100多个碱基，达到30兆碱基。

使用单细胞荧光成像，研究人员表征了53BP1修复灶形成和溶解的多个周期，第一个周期比随后的周期更长，并且其持续时间受修复抑制作用的调节。成像引导的亚细胞Cas9激活进一步促进了单等位基因分辨率的基因组操作。vfCRISPR可以在空间、时间和基因组坐标上进行高分辨率的DNA修复研究。