速冻组织

• 将组织块平放于软塑料盖或特制小盒内（直径 2 cm），如组织块小可适量加 OCT 包埋剂浸没组织，然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内，当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾，此时小盒保持原位切勿浸入液氮内，大约 10-20 秒组织即迅速冰冻成块。取出组织冰块立即置入-80℃ 冰箱储存备用，或置于恒冷切片机冰冻切片。

冰冻切片 4~8 mm，冰冻切片后如不染色，必须吹干，储存低温冰箱内，或进行短暂预固定后储存冰箱内保存。

室温放置 30 分钟后，入 4℃ 丙酮固定 10 分钟。也可根据需要选择其它的固定方式。

PBS 洗，5 分钟×3。

用 3% 过氧化氢孵育 5~10 分钟，消除内源性过氧化物酶的活性。

PBS 洗，5 分钟×3。

下接石蜡切片免疫组化染色操作步骤（滴加一抗开始）。