用了那么多 RPMI-1640，可是你当真知道它的由来吗? RPMI 是 Roswell Park Memorial Institute 的缩写，代指洛斯维公园纪念研究所。RPMI 是该研究所研发的一类细胞培养 基，1640 是培养基代号。
RPMI 1640 培养基用于人类白血病细胞悬浮液单层细胞培养。目前 RPMI 1640 已经被发现适合于各种各样的哺乳动物细胞，包括 Jurkat 细胞，MCF-7，PC12，外周血单个核细胞，星形胶质细胞和癌、人上皮细胞结肠直肠腺癌（HCT-15）、人淋巴样 Burkitt 淋巴瘤（EB-3、Raji）、组织细胞淋巴瘤（U937）、人成淋巴细胞骨髓瘤病人骨髓（IM-9）、淋巴瘤病人血液（Daudi）、T 细胞淋巴瘤（H9）、早幼粒细胞白血病（HL-60）、T 细胞白血病（Jurkat）、骨髓性白血病（K-562）、（PC12、B95-8）。
在实验中我们经常会需要自己配置 RPMI1640 培养基，在配置的过程中需要注意哪些？哪些因素会影响到 RPMI1640 培养基的配置效果呢? 中生奥邦今天教您如何配置优质 RPMI1640 培养基, 详情请看下文：
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- 配制培养基最好使用新制备的三蒸水。一般在试验前当天或前一天制备为好。调节 pH 值的酸碱溶液也应该使用这种水配制。
- 培养液配好后，应先抽取少许放入培养瓶内，于 37℃ 温箱内置 24～48 hr，以检测培养液是否有污染。
- 溶解培养基：将干粉培养基溶于总量 1/3 的水中，再用水洗包装袋内面两次，倒入培养液中。振荡或超声助溶，一般不要加热助溶。
- 补加试剂：根据包装袋说明和试验需要加入 NaHCO3(2.0 g)、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES 等其他试剂。
- 加抗生素：一般抗生素终浓度为――青霉素 100U/ml，链霉素 100U/ml。市售青霉素为 80 万 U/瓶，可溶于 4 ml 体积，每一升培养液中加 0.5 ml 即可。市售链霉素为 100 万 U/瓶，可溶于 5 ml 体积，每一升培养液中也加 0.5 ml 即可。无链霉素的情况下，用庆大霉素代替，终浓度调为 50～200U/ml。
- 调 pH 值：加水到 900 ml(在需要加 10% 小牛血清的情况下)，然后用 5% NaHCO3 调节 pH 到 7.2。
- 过滤除菌：宜采用 0.45um 和 0.22um 滤膜各一张，上层为 0.45um，下层为 0.22um，以保证过滤效果。注意滤膜正面 (光面) 朝上。过滤后分装于小瓶中 (100 或 200 ml)。
- 加小牛血清：根据培养基配制的量将小牛血清分装，冷冻保存 (-20℃)。临用前将加入小牛血清 (10%~20%)。
- 每次配液时，需要的其他辅助性液体 (Hanks，胰蛋白酶消化液，PBS ，抗生素溶液等) 也可以同时配制，分别过滤。
- 市售小牛血清使用前都应该灭活 (56℃，30 min)，以消除补体活性。动物血清个体差异大，故而每一批血清都进行严格检测，同时进行无菌试验。优质血清应该为淡黄色，透明，无溶血，无沉淀，灭活后颜色稍深。生化检测总蛋白含量 3.5~4.5 g/100 ml，球蛋白不高于 2 g/100 ml。选定一个效果较好的批号后，可一次多购该批号的血清，保证试验条件的稳定。
- 由于市售小牛血清 pH 未知，但大多偏酸。试验中加入小牛血清后，培养基的 pH 可能还会变化，故亦可先加入小牛血清后调 pH 值。但此种方法过滤较困难，只适于正压过滤。
- 每次配液量以两周左右为宜，一次配液不要太多，防止营养成分 (主要为谷氨酰胺) 损失，造成实验繁琐或者污染。
- 最后，制备培养基的器皿清洗要绝对干净，烤干后备用 (滤器 、滤膜、量筒、移液管及盛放培养基的小瓶等存放和转移培养基液体的器具都应进行灭菌)。
掌握以上技能，导师再也不用担心我的培养基问题啦~
中生奥邦培养基都经系统检测以确保产品效能均一性，从生产质量控制及最终产品包装，我们交付的是最好的培养基。配置干粉均采用进口原材料，产品均按照书面批准的规范进行配置，进过溶解和消毒过滤。所有产品经过 0.1um 过滤，内毒素监测值均小于 0.25EU/ml，经过严格检测。
中生奥邦，旨在为您提供最优质的产品，欢迎拨打010-58494810/11来电垂询。
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