相信大家在真核细胞上清液中纯化蛋白都会跟小编一样遇到：通常情况下胞外分泌蛋白的浓度很低，且蛋白很容易被细胞上清液中的蛋白酶降解、操作过程过于繁琐等问题。那么有什么方法可以轻松纯化 His 标签胞外分泌蛋白呢？
 
小编告诉大家 Cube Biotech 实验室的科学家找到了一个新的方法来纯化分泌在胞外的 His 标签蛋白。Cube Biotech 的科学家通过把磁珠直接加入溶液，从平衡体系中分离出带 His 标签的蛋白原理，不断进行实验测试，最终开发了一个新的方法，可以使整个纯化过程变得比以前更加容易。
 
当然，新的方法能够成功也是因为 Cube Biotech 所有的亲和纯化磁珠：NTA，IDA，和新的 INDIGO 系列产品都可以通过高温蒸汽灭菌锅处理。有兴趣尝试 Cube Biotech 新方法用于下一次表达的 His 标签胞外分泌蛋白的小伙伴，请参看如下的操作流程： 
 

 
1. 拿一小瓶 PureCube His 标签亲和磁珠（Ni-INDIGO、Ni-NTA、Ni-IDA）移去保护液并添加同体积 PBS 后用高温蒸汽灭菌处理。

2. 在培养瓶中装入细胞培养液并接种细胞。

3. 在培养瓶中加入高温蒸汽处理过的 100μl（25% 含量）的磁珠到 50 ml 培养液中。磁珠用量也可以通过蛋白表达量来计算。

4. 在培养瓶外贴上磁铁后按照通常的方法培养细胞。当带 His 标签的蛋白分泌到上清液后将会被磁珠捕获。

5. 需要收集蛋白时，将培养液取出并用清洗液清洗固定在培养瓶壁上的磁珠。

6. 去掉磁铁后将磁珠转移到一个干净的小管内。

7. 加入洗脱液反应后将洗脱液转移到另一个干净的小管内。

8. 洗脱液中含有纯化出的带 His 标签的目标蛋白。