HEK293作为表达研究外源基因最常用的细胞株，已经普遍存在于各位手中，但是怎么提高转染效率呢？小编悄悄的告诉你，有一种转染叫瞬时转染。怎样的培养基可以实现这一目的呢？Come on everyone，让我们来了解下这个磨人的小妖精吧~~
一：瞬时转染：研究转录调控最常用的功能性分析方法。在瞬时转染中，重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因，并高水平的表达。转染的质粒DNA不必整合到宿主染色体，可以在特定时刻测定从报告基因上合成的mRNA或蛋白质，从而测定调控区的活性。
二：瞬时转染实验操作：以下操作以293F细胞的转染操作为例
1. 转染前准备工作：
将密度为0.3-0.35X106 cells/mL的HEK293F细胞传代接种于20mL培养基中，拧紧瓶盖，置于36.5℃，175rpm，5%CO2 的条件下培养。当细胞密度达到2-3X106 cells/mL时（一般需要3天）用培养基SMM 293 TI（货号：SMM293TI，北京义翘神州）处理细胞，使细胞密度稀释达到1X106 cells/mL，分装细胞液，使每瓶细胞液体积为20mL，然后旋紧瓶口放入摇床继续培养，2-4小时后即可行转染。
2. 配制1ml的转染液：质粒DNA与转染试剂的用量需优化
取约850μL 的浓度为150 mM 灭菌的NaCl溶液稀释10μg DNA（如DNA浓度为100ng/μL，需要吸取100μL DNA原液），混匀后在工作台静置5min；5min后，往DNA稀释液中加入约50μL的Sinofection转染试剂，最终转染液的总体积为1mL，混匀在工作台后放置10min。
详见转染试剂的说明书（货号：STF02）
3. 将转染液逐滴加入到细胞培养液中，摇匀后旋紧瓶口放回摇床（36.5℃， 关闭5%CO2，175rpm）。
4. 转染20-24h后加入SMS 293-I加料液（0.7mL/瓶，具体加入量可以自己摸索），之后隔天加料培养6-10天
5. 转染48-72h后可检测基因表达。重组蛋白表达、生产，抗体生产等均可用到此技术。
义翘神州SF293T1 瞬时表达系统可以实现一步转染
注意： 小编不得不说，为了达到更好的细胞转染培养效果，如果实验过程中需要更换培养基，最好要对细胞进行驯化。
三：驯化
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一：瞬时转染：研究转录调控最常用的功能性分析方法。在瞬时转染中，重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因，并高水平的表达。转染的质粒DNA不必整合到宿主染色体，可以在特定时刻测定从报告基因上合成的mRNA或蛋白质，从而测定调控区的活性。
二：瞬时转染实验操作：以下操作以293F细胞的转染操作为例
1. 转染前准备工作：
将密度为0.3-0.35X106 cells/mL的HEK293F细胞传代接种于20mL培养基中，拧紧瓶盖，置于36.5℃，175rpm，5%CO2 的条件下培养。当细胞密度达到2-3X106 cells/mL时（一般需要3天）用培养基SMM 293 TI（货号：SMM293TI，北京义翘神州）处理细胞，使细胞密度稀释达到1X106 cells/mL，分装细胞液，使每瓶细胞液体积为20mL，然后旋紧瓶口放入摇床继续培养，2-4小时后即可行转染。
2. 配制1ml的转染液：质粒DNA与转染试剂的用量需优化
取约850μL 的浓度为150 mM 灭菌的NaCl溶液稀释10μg DNA（如DNA浓度为100ng/μL，需要吸取100μL DNA原液），混匀后在工作台静置5min；5min后，往DNA稀释液中加入约50μL的Sinofection转染试剂，最终转染液的总体积为1mL，混匀在工作台后放置10min。
详见转染试剂的说明书（货号：STF02）
3. 将转染液逐滴加入到细胞培养液中，摇匀后旋紧瓶口放回摇床（36.5℃， 关闭5%CO2，175rpm）。
4. 转染20-24h后加入SMS 293-I加料液（0.7mL/瓶，具体加入量可以自己摸索），之后隔天加料培养6-10天
5. 转染48-72h后可检测基因表达。重组蛋白表达、生产，抗体生产等均可用到此技术。
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注意： 小编不得不说，为了达到更好的细胞转染培养效果，如果实验过程中需要更换培养基，最好要对细胞进行驯化。
三：驯化
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