研究背景
胃癌（Gastric cancer，GC）是我国常见的恶性肿瘤之一，在我国其发病率居各类肿瘤首位 。然而现阶段治疗胃癌的方法还主要是手术切除和辅助化疗，胃癌预后差，高转移和手术后易复发造成了患者 5 年生存期仅 30%，这也使得越来越多的的科学家投入到胃癌研究中，以探索其发病的分子机制和治疗方法。
在胃癌研究中，中国科学家也取得了非常瞩目的成就。2016 年 10 月 3 日，国际著名学术期刊《Oncogene》（IF=7.932）在线刊登了上海交通大学医学院附属瑞金医院苏丽萍教授的科研团队在胃癌研究中的最新成果。该研究团队发现转导素β1X 连锁受体蛋白 1（Transducin (β)-like 1 X-linked receptor 1 ，TBL1XR1）在胃癌中表达显著增高。科研人员通过调节胃癌细胞中 TBL1XR1 的表达，发现 TBL1XR1 能够调控细胞的生长、迁移和侵袭，同时能够激活β-catenin/MMP7/EGFR/ERK 信号通路，即在体外调节 EMT 的发生，在体内影响肿瘤的发生和腹膜转移。这一系列的研究表明 TBL1XR1 在胃癌的发生发展中扮演着非常重要角色。文中使用的慢病毒质粒由和元生物提供。
TBL1XR1：转导素β1X 连锁受体蛋白 1
β-catenin：β-链蛋白
MMP7：基质金属蛋白酶 7
EGFR：表皮生长因子受体
ERK1/2：细胞外调节蛋白激酶 1/2
研究思路
研究结果
1、在胃癌患者组织样本和细胞系中 TBL1XR1 高表达
研究人员通过 qPCR 检测 31 组患者的胃癌组织和癌旁组织中 TBL1XR1 的表达，发现肿瘤组织中 TBL1XR1 的表达量明显高于正常组织。研究人员进一步对 134 组患者的胃癌组织和癌旁组织进行免疫组化，发现在癌组织中有 61.2% 的细胞是 TBL1XR1 高表达的阳性细胞，而在临近的正常组织中仅有 30.7% 的细胞是 TBL1XR1 高表达的阳性细胞。分析患者的生存期发现 TBL1XR1 高表达的患者的生存期明显低于 TBL1XR1 低表达的患者。此外，组织免疫荧光和胃癌细胞系的表达检测都进一步印证了 TBL1XR1 与胃癌的发生发展有着密切的相关性（如下图）。
2、体外 TBL1XR1 促进胃癌细胞的增殖
研究人员在多株胃癌细胞系中敲低 TBL1XR1 表达发现，细胞增殖受到抑制，细胞凋亡显示增加，同时通过克隆形成实验发现，细胞的克隆形成能力明显受到抑制，这都表明 TBL1XR1 能够促进胃癌细胞的增殖（如下图）。
3 、TBL1XR1 促进胃癌细胞的迁移、侵袭能力
为了进一步研究 TBL1XR1 对胃癌细胞的影响，研究人员通过细胞划痕实验和 Transwell 侵袭实验发现，敲低 TBL1XR1 后细胞的迁移和侵袭能力明显受到抑制。Western blot 检测发现上皮细胞标记蛋白α-catenin 、E-cadherin，间充质细胞标记蛋白 N-cadherin、 ZEB2 的表达都明显受到 TBL1XR1 的影响。而这四种蛋白是 EMT 的标志性蛋白，这也说明了 TBL1XR1 可能是通过调控 EMT 的发生，来调控胃癌细胞的迁移和侵袭（如下图）。
4、TBL1XR1 通过 ERK1/2 信号通路来调控胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭
既然 TBL1XR1 能够调控 GC 细胞的增殖和迁移，那么是通过什么信号通路来调控的呢？已有的研究已经表明 ERK1/2 在 EMT 的发生过程中起到重要的作用，研究人员分析病人样本和 GC 细胞发现，ERK1/2 在胃癌组织和细胞中发生磷酸化，当用 ERK 的特异性抑制剂 U0126 处理细胞发现，细胞的增殖受到抑制，迁移能力下降，EMT 相关蛋白的表达受到影响。而敲低 TBL1XR1 能明显观察到 ERK 的磷酸化受到抑制，这表明 TBL1XR1 能够调控 ERK1/2 信号通路来调控胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭（如下图）。
5、TBL1XR1 通过β-catenin/MMP7/EGFR 信号通路激活 ERK1/2
有研究报道，TBL1XR1 能够通过调控β-catenin 信号通路来促进肿瘤细胞 EMT 的发生。研究人员发现在 GC 细胞敲低 TBL1XR1 能显著抑制β-catenin 的磷酸化，用β-catenin 的抑制剂 XAV939 处理细胞，ERK 的磷酸化明显受到抑制，但是当过表达 TBL1XR1 时，β-catenin 和 ERK1/2 的磷酸化明显增强，这说明 TBL1XR1 能够通过β-catenin 信号通路激活 ERK1/2。为了进一确认 TBL1XR1 确实调控β-catenin 信号通路，研究人员检测了β-catenin 信号通路的相关蛋白 MMP7 和 EGFP，发现 TBL1XR1 能够促进 MMP7 表达和 EGFP 的磷酸化，这表明 TBL1XR1 通过β-catenin/MMP7/EGFR 信号通路激活 ERK1/2，从而调控 GC 细胞的增殖和迁移（如下图）。
6、TBL1XR1 促进裸鼠皮下成瘤和腹膜转移
研究人员在体内进一步研究 TBL1XR1 的功能，研究人员通过裸鼠皮下成瘤和腹膜转移实验发现，过表达 TBL1XR1 能明显促进肿瘤增长和转移，而敲低过表达 TBL1XR1 则抑制增长和转移，免疫组化明显看到 ERK1/2 的磷酸化增加，EMT 相关蛋白的表达受到影响（如下图）。
文章小结
发现胃癌治疗新方法对于提升胃癌患者的生存期、提高患者的生活质量、减少病人痛苦至关重要。研究人员首先分析胃癌病人肿瘤样本发现 TBL1XR1 与肿瘤的发生发展有着密切的相关性，而通过体内动物实验和体外细胞实验进一步证明 TBL1XR1 能够通过β-catenin /MMP7/EGFR 信号通路激活下游的 ERK1/2 信号通路促进 GC 细胞的增殖，并且能够影响 EMT 的发生，促进肿瘤的转移和侵袭。因此本研究为胃癌治疗提供了新思路。
胃癌（Gastric cancer，GC）是我国常见的恶性肿瘤之一，在我国其发病率居各类肿瘤首位 。然而现阶段治疗胃癌的方法还主要是手术切除和辅助化疗，胃癌预后差，高转移和手术后易复发造成了患者 5 年生存期仅 30%，这也使得越来越多的的科学家投入到胃癌研究中，以探索其发病的分子机制和治疗方法。
在胃癌研究中，中国科学家也取得了非常瞩目的成就。2016 年 10 月 3 日，国际著名学术期刊《Oncogene》（IF=7.932）在线刊登了上海交通大学医学院附属瑞金医院苏丽萍教授的科研团队在胃癌研究中的最新成果。该研究团队发现转导素β1X 连锁受体蛋白 1（Transducin (β)-like 1 X-linked receptor 1 ，TBL1XR1）在胃癌中表达显著增高。科研人员通过调节胃癌细胞中 TBL1XR1 的表达，发现 TBL1XR1 能够调控细胞的生长、迁移和侵袭，同时能够激活β-catenin/MMP7/EGFR/ERK 信号通路，即在体外调节 EMT 的发生，在体内影响肿瘤的发生和腹膜转移。这一系列的研究表明 TBL1XR1 在胃癌的发生发展中扮演着非常重要角色。文中使用的慢病毒质粒由和元生物提供。
TBL1XR1：转导素β1X 连锁受体蛋白 1
β-catenin：β-链蛋白
MMP7：基质金属蛋白酶 7
EGFR：表皮生长因子受体
ERK1/2：细胞外调节蛋白激酶 1/2
研究思路
研究结果
1、在胃癌患者组织样本和细胞系中 TBL1XR1 高表达
研究人员通过 qPCR 检测 31 组患者的胃癌组织和癌旁组织中 TBL1XR1 的表达，发现肿瘤组织中 TBL1XR1 的表达量明显高于正常组织。研究人员进一步对 134 组患者的胃癌组织和癌旁组织进行免疫组化，发现在癌组织中有 61.2% 的细胞是 TBL1XR1 高表达的阳性细胞，而在临近的正常组织中仅有 30.7% 的细胞是 TBL1XR1 高表达的阳性细胞。分析患者的生存期发现 TBL1XR1 高表达的患者的生存期明显低于 TBL1XR1 低表达的患者。此外，组织免疫荧光和胃癌细胞系的表达检测都进一步印证了 TBL1XR1 与胃癌的发生发展有着密切的相关性（如下图）。
2、体外 TBL1XR1 促进胃癌细胞的增殖
研究人员在多株胃癌细胞系中敲低 TBL1XR1 表达发现，细胞增殖受到抑制，细胞凋亡显示增加，同时通过克隆形成实验发现，细胞的克隆形成能力明显受到抑制，这都表明 TBL1XR1 能够促进胃癌细胞的增殖（如下图）。
3 、TBL1XR1 促进胃癌细胞的迁移、侵袭能力
为了进一步研究 TBL1XR1 对胃癌细胞的影响，研究人员通过细胞划痕实验和 Transwell 侵袭实验发现，敲低 TBL1XR1 后细胞的迁移和侵袭能力明显受到抑制。Western blot 检测发现上皮细胞标记蛋白α-catenin 、E-cadherin，间充质细胞标记蛋白 N-cadherin、 ZEB2 的表达都明显受到 TBL1XR1 的影响。而这四种蛋白是 EMT 的标志性蛋白，这也说明了 TBL1XR1 可能是通过调控 EMT 的发生，来调控胃癌细胞的迁移和侵袭（如下图）。
4、TBL1XR1 通过 ERK1/2 信号通路来调控胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭
既然 TBL1XR1 能够调控 GC 细胞的增殖和迁移，那么是通过什么信号通路来调控的呢？已有的研究已经表明 ERK1/2 在 EMT 的发生过程中起到重要的作用，研究人员分析病人样本和 GC 细胞发现，ERK1/2 在胃癌组织和细胞中发生磷酸化，当用 ERK 的特异性抑制剂 U0126 处理细胞发现，细胞的增殖受到抑制，迁移能力下降，EMT 相关蛋白的表达受到影响。而敲低 TBL1XR1 能明显观察到 ERK 的磷酸化受到抑制，这表明 TBL1XR1 能够调控 ERK1/2 信号通路来调控胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭（如下图）。
5、TBL1XR1 通过β-catenin/MMP7/EGFR 信号通路激活 ERK1/2
有研究报道，TBL1XR1 能够通过调控β-catenin 信号通路来促进肿瘤细胞 EMT 的发生。研究人员发现在 GC 细胞敲低 TBL1XR1 能显著抑制β-catenin 的磷酸化，用β-catenin 的抑制剂 XAV939 处理细胞，ERK 的磷酸化明显受到抑制，但是当过表达 TBL1XR1 时，β-catenin 和 ERK1/2 的磷酸化明显增强，这说明 TBL1XR1 能够通过β-catenin 信号通路激活 ERK1/2。为了进一确认 TBL1XR1 确实调控β-catenin 信号通路，研究人员检测了β-catenin 信号通路的相关蛋白 MMP7 和 EGFP，发现 TBL1XR1 能够促进 MMP7 表达和 EGFP 的磷酸化，这表明 TBL1XR1 通过β-catenin/MMP7/EGFR 信号通路激活 ERK1/2，从而调控 GC 细胞的增殖和迁移（如下图）。
6、TBL1XR1 促进裸鼠皮下成瘤和腹膜转移
研究人员在体内进一步研究 TBL1XR1 的功能，研究人员通过裸鼠皮下成瘤和腹膜转移实验发现，过表达 TBL1XR1 能明显促进肿瘤增长和转移，而敲低过表达 TBL1XR1 则抑制增长和转移，免疫组化明显看到 ERK1/2 的磷酸化增加，EMT 相关蛋白的表达受到影响（如下图）。
文章小结
发现胃癌治疗新方法对于提升胃癌患者的生存期、提高患者的生活质量、减少病人痛苦至关重要。研究人员首先分析胃癌病人肿瘤样本发现 TBL1XR1 与肿瘤的发生发展有着密切的相关性，而通过体内动物实验和体外细胞实验进一步证明 TBL1XR1 能够通过β-catenin /MMP7/EGFR 信号通路激活下游的 ERK1/2 信号通路促进 GC 细胞的增殖，并且能够影响 EMT 的发生，促进肿瘤的转移和侵袭。因此本研究为胃癌治疗提供了新思路。
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