资讯

当 PCR 诞生时 意外发生了...

2015-06-09 17:59

有时候一个创造性的灵感在你不经意中突然浮现出来。美国Mullis教授开汽车时的联想到逶迤崎岖的山路和DNA双螺旋结构,行驶的汽车和一小段DNA引物……,1985年发明了PCR技术,8年后也就是1993年获得诺贝尔奖,这在科学史上是史无前例的,说明其价值的重大。Mullis教授回忆了下面一个有趣的故事。


在1983年4月的一个星期五的晚上,通过难以置信的天真的甚至幸运的错误巧合,我获得了一个重大发现。那天晚上我正在紧握着轿车的方向盘,在一条被月光笼罩的通向北加利福尼亚Redwood country的山路上蜿蜒前行。这个重大发现就是我偶然想到的有关不受限制地制造大量的基因拷贝的过程,这个过程现在称为聚合酶链式反应(PCR)。

晚春的一个周五的晚上,我和一个化学家朋友正在驱车去Mendocino县的路上,她睡着了,美国10l国道也没有驾车要求了。我喜欢晚上驾车,每个周末我都要去我北部的小木屋并在车上静静地呆上3个小时,来放纵我的思维。那个特殊的晚上我正在想着我计划中的DNA测序实验。

车行至Cloverdale附近,这里从美国101国道西北方向分支出加利福尼亚州128支路,公路沿海岸线蜿蜒而曲折,我断定如果用两条寡核苷酸而不是一条时,结果将更可靠。由一条寡核苷酸引导靶DNA一条链的合成,我可以获得关于两条链的互补序列的信息。因此,这个实验在没有过多不便的条件下包含了一个内在的控制手段。

虽然我当时没有认识到这一点,即用我大脑构想出来的两条寡核苷酸链。它们的3’引物末端在靶基因互补链上指向对方,我处于发现聚合酶链式反应的边缘。然而,我感受最深的是山路的边缘。

那天晚上,空气中弥漫了潮湿气味和七叶树花瓣的香味.对路边白色树干不经意的一瞥使我脑海中闪现了火花……太高兴了,在脑海中我开始了对2的乘幂:2,4,8,16, 32…….我隐约记起2的10次幂是大约1000,并且2的20次幂大约为一百万.我停下我的汽车在公路旁侧,俯瞰安德森山谷.从手套兜里拿出铅笔和纸——我需要验算我的计算.我的熟睡着的乘客Jennifer晕头晕脑地抗议我停下车来及它的灯光,但我大叫说:我有了一个奇妙的发现.她不知所以然的又睡去了.我确证2的20次幂确实超过了一百万以上,并且可依此类推.

沿这条路又走了大约一英里,我发现了反应产物中的其他方面.用引物进行几轮延伸后,延伸产物解链,再与新的引物杂交并延伸,呈指数增长的DNA链的长度是固定的.因为它们的末端被寡核苷酸引物的5’引物末端严格限制.我可以通过设计与序列两端杂交的引物来获得起始DNA样品的较大片段.这个片段是一个特定长度的分离的单元.

我再次停下车来并开始画与DNA线性分子杂交和延伸的流程,一个循环的产物成为下一个链式反应的模板…….Jennifer晕晕糊糊地再次抗议."你不会相信,"我大叫,"简直不可思议!"她拒绝起床.我继续向小木屋前进再没有停下来.安德森山谷的终点是红树县(Redwood country)的起点,并且是游手好闲者居住的地方.我的发现使我仿佛感觉我已打破了这个古老山谷的寂静,那天晚上在我脑海中爆发的脱氧核糖核苷酸使我彻夜未眠.PCR的发明是DNA操作技术的革命!


了解更多有意思的前沿资讯以及爽酷的实验方法,那就找师兄吧
师兄微信号:shixiongcoming

来源:丁香园 点击量:

扫码关注「实验菌」,入科研社群,领学习资源

更有优质直播、研选好物、福利活动等你来!

评论

lingboxian

很鼓舞人心

商家推荐

L-5102世界上最专业的高GC含量PCR产品诞生了

询价

KOD FX Neo史上最牛的PCR酶诞生了!

询价

Brucella inopinata岐见玛瑙宝螺种布鲁氏菌(意外布鲁氏菌)靶基因阳性对照质粒-PCR引物-TaqMan Probe探针三件套(不含PCR试剂)

¥1592

鲑鱼促胰液素/胰泌素(SCT)酶联免疫elisa分析试剂盒使用说明书

询价

TREM1试剂盒

¥800 - 2860

人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)elisa定量检测试剂盒品牌

询价

SMARCD3 Antibody

¥1960 - 3050

SMC1 Antibody

¥1960 - 3050

SMC1B Antibody

¥1960 - 3050

SMCP Antibody

¥1960 - 3050