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文献和实验
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提供商 :舒桐生物
服务名称 :基因定点敲入/点突变细胞系
规格 :1
精准基因编辑细胞株定制
随着ZFN、TALEN和CRISPR-Cas9技术的兴起,基因组编辑领域获得长远的发展。借助靶向基因组编辑工具,我们可以在基因组水平上精确编辑,设计产生全新的细胞株模型。定制精准编辑细胞株模型(genome edited cell line models)是体内研究基因功能的理想工具,已成为现代生物学在基因功能研究、肿瘤治疗和生物制药等领域重要的研究材料。基因组编辑技术(genome editing)是一种可以在基因组水平上对DNA序列进行改造的遗传操作技术。这种技术的原理是构建一个人工内切酶,在预定的基因组位置切断DNA,切断的DNA在被细胞内的DNA修复系统修复过程中会产生突变,从而达到定点改造基因组的目的。DNA修复系统主要通过两种途径修复DNA双链断裂(double-strand break,DSB),即非同源末端连接(Nonhomologous end joining, NHEJ)和同源重组(homologous recombination, HR)。舒桐科技有限公司不断探索基因组编辑在多种细胞系中的应用,已成功在数十种细胞系中实现了高效基因组编辑。基于慢病毒包装技术、转座子技术及 CRISPR/Cas9 靶向基因编辑技术,推出了精准编辑细胞株定制服务,包括基因敲除、定点基因敲入、点突变和定点基因大片段删除。
定点基因大片段删除细胞系
基因敲除细胞株模型是开展基因功能研究、靶点验证及药物筛选的重要工具。CRISPR/Cas9技术的出现,使得基因敲除细胞株的成功率大大提高,但在传统的基因敲除方案中,通常是利用非同源末端连接造成的移码突变使编码基因移码而失活,造成基因功能性敲除。在哺乳动物基因组中,约80%的序列是非编码的,这些非编码的基因也被证明有重要功能。对于这些非编码基因,有时移码突变或者部分外显子的缺失并不能有效使其功能失活,只有大片段的切除基因序列才能达到敲除目的。针对这一情况,鼓润医疗科技有限公司结合CRISPR/Cas9技术,开发出基于CRISPR/Cas9的大片段删除项目,可实现基因组片段敲除,敲除更彻底。尤其非常适合于lncRNA的敲除应用。
定点基因大片段删除细胞系构建流程
交付周期3-4个月
定点基因大片段删除细胞系细胞系交付材料
(1)靶基因敲除单克隆细胞系冻存细胞2支;(2)实验测序数据;
(3)详细的实验结题报告(包括实验步骤,引物信息,实验结果等)
舒桐基因大片段删除技术优势
(1)自主研发优化的sgRNA筛选系统,针对目的基因设计数条sgRNA,细胞内水平筛选切割效率最高的sgRNA。进一步构建multiplex sgRNA质粒。zui大程度提高编辑成功率;(2)针对不同细胞系制定专属方案,有效提高编辑成功率;
(3)服务团队经验丰富,确保服务质量。
珠海舒桐医疗科技有限公司
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