Rat TIMP-1 ELISA Kit

Rat TIMP-1 ELISA Kit

价格: ¥2980

品牌:碧云天(beyotime) 品牌认证

货号:PT885

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产品详情

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样本 :大鼠血清、血浆或细胞培养上清液

应用 :大鼠金属蛋白酶组织抑制剂1酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测大鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的TIMP-1的ELISA试剂盒。

检测方法 :双抗体夹心ELISA

检测限 :最小检出量为24pg/ml

规格 :96次

碧云天的Rat TIMP-1 ELISA Kit (Rat Tissue Inhibitors of Metalloproteinases 1 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即大鼠金属蛋白酶组织抑制剂1酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测大鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的TIMP-1的ELISA试剂盒。

本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。多次重复检测结果表明,最小检出量为24pg/ml,与人TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3、TIMP-4, 小鼠TIMP-1等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。

基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinases, MMPs)是一种具有锌指结构的肽链内切酶,能够催化细胞外基质蛋白发生降解,从而调控发育、组织重构、伤口愈合和肿瘤转移等过程。MMPs以酶原形式分泌,酶原经过蛋白水解后变成有活性的MMPs。金属蛋白酶组织抑制剂(Tissue Inhibitors of Metalloproteinases, TIMP)通过与MMPs形成1:1的复合物抑制MMPs活性。TIMPs与MMPs以非共价键相连,能够阻止MMP与底物连接。TIMP-1属于诱导型蛋白而TIMP-2属于组成型蛋白,二者都属于游离蛋白且分布广泛;TIMP-3主要分布在细胞外基质,TIMP-4则只存在于心肌组织。

TIMP-1是一种氨基酸长度为184的糖基化蛋白,但糖基化并非维持其活性所必须。TIMP-1具有12个半胱氨酸残基,参与形成结构中的二硫键,分子N端具有与MMP底物结合位点相结合的基团,C端则能够与MMP外部结合,增强整体的亲和力。TIMP-1与无活性的pro-MMP-9具有很强的结合能力,在与pro-MMP-9形成复合物后,TIMP-1凭借N端的结合位点依旧保持着抑制其他活化MMP的能力。

许多细胞和组织都能够合成TIMP-1。TIMP-1基因的转录受到IL-1、IL-6、OSM、LIF和TNF-α等许多细胞因子和佛波酯的调控。TIMP-1的许多生理功能都与MMPs密切相关,MMP/TIMP-1浓度失衡会导致关节炎、肿瘤生长和转移等病理改变。另一方面,TIMP-1也具有一些独立的功能,例如TIMP-1能够抑制B细胞的凋亡,说明TIMP-1除了抑制MMPs外,还能够与一些特定细胞结合并进入细胞核内,促进特定细胞的存活和生长。

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中大鼠TIMP-1的浓度,其原理见图1。大鼠TIMP-1特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标准品或样品时,其中的大鼠TIMP-1会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗大鼠TIMP-1抗体后,生物素化抗大鼠TIMP-1抗体与大鼠TIMP-1结合,形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin),由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合,因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液,固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。大鼠TIMP-1浓度与A450值呈正比,通过绘制标准曲线,对照样品吸光度值,即可计算出样品中大鼠TIMP-1浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒,包括标准品检测,可以进行96次检测。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
PT885-1 大鼠TIMP-1抗体预包被板 8孔×12条
PT885-2 样品分析缓冲液 5ml
PT885-3 标准品稀释液(5X) 10ml
PT885-4 大鼠TIMP-1标准品 2-4瓶
PT885-5 大鼠TIMP-1生物素化抗体 10ml
PT885-6 辣根过氧化物酶标记Streptavidin 10ml
PT885-7 洗涤液(20X) 30ml
PT885-8 TMB溶液 10ml
PT885-9 终止液 5ml
PT885-10 封板膜(透明) 2张
PT885-11 封板膜(白色) 2张
说明书 1份

保存条件:

标准品4℃保存,1-2周内有效,-20℃保存6个月内有效;试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外,试剂盒其它组分严禁冻存。
更多产品简介及说明书见碧云天官网:https://www.beyotime.com/index.htm
 

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