Rat MMP-9 ELISA Kit

样本 ：大鼠血清、血浆或细胞培养上清液

应用 ：大鼠基质金属蛋白酶9酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测大鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的MMP-9的ELISA试剂盒。

检测方法 ：双抗体夹心ELISA法

检测限 ：46pg/ml

规格 ：96次

碧云天的Rat MMP-9 ELISA Kit (Rat Matrix Metalloproteinase 9 Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即大鼠基质金属蛋白酶9酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测大鼠血清、血浆或细胞培养上清液中的MMP-9的ELISA试剂盒。

本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。多次重复检测结果表明，最小检出量为46pg/ml，与大鼠MMP-8、Lipocalin-2、TIMP-1、人MMP-9等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。

基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinases, MMPs)是一类Zn²⁺和Ca²⁺依赖性的肽链内切酶，主要参与细胞外基质降解和不同亚细胞环境下多种分子的表达过程。MMPs在胚胎发育、形态发生、繁殖和组织重构等许多生理过程中发挥重要作用，也同样参与炎症和自身免疫紊乱等病理过程。MMPs的内源性抑制剂主要有α2巨球蛋白和金属蛋白酶组织抑制剂(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase, TIMPs)。

基质金属蛋白酶9 (Matrix Metalloproteinases 9, MMP-9)，又被称作明胶酶B、92kDa IV型胶原蛋白酶、92kDa明胶酶和V型胶原蛋白酶，以糖基化酶原的形式分泌，经过蛋白水解去除N端的前导肽后得到分子量为82kDa的活性MMP-9。活化的人MMP-9与小鼠MMP-9和大鼠MMP-9分别具有72%和74%的氨基酸同源性。MMP-9结构上除了具有锌指结构外，在催化区域还具有三个连续的能够与明胶结合的同源II型纤连蛋白。催化区域与C端的hemopexin-like区域通过一个脯氨酸富集的铰链相连。MMP-9能够特异性的降解细胞外基质中的明胶成分，还能作用于III、IV、V、XI型胶原蛋白、弹性蛋白、巢蛋白和玻璃体结合蛋白。MMP-9还能够作用于许多细胞因子、生长因子、β淀粉样蛋白、神经肽P物质和髓鞘碱性蛋白，这会影响到这些可溶性因子的生物活性，并且能将它们从相关的细胞基质中释放出来。MMP-9还能够触发多种跨膜蛋白的信号传递或通过诱导这些跨膜蛋白脱落实现抑制其信号的效果，这些跨膜蛋白主要包括钙粘蛋白、整合素、ICAM-1和CD44等。

能够产生MMP-9的细胞主要包括中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、星形胶质细胞、成纤维细胞、破骨细胞、软骨细胞、角质细胞、内皮细胞和上皮细胞等。中性粒细胞分泌的MMP-9在一定程度上通过产生胶原蛋白来源多肽诱导中性粒细胞分泌更多的MMP-9，从而加剧炎症反应。在骨形成及重构、神经元突触重构、移植过程的滋养层细胞浸润及丝氨酸蛋白酶抑制剂失活等过程中MMP-9也发挥了重要作用。

MMP-9水平在一些炎症性疾病中会出现升高，例如管腔内血栓形成、动脉粥样硬化、克罗恩病、丙肝病毒感染、结直肠癌和Duchenne肌肉萎缩等。MMP-9/TIMP-1的比率在多种硬化病人血清和囊性纤维化病人痰液中都有所升高，但是在巨细胞病毒感染时，该比率会出现下降。在卵巢癌和子宫感染患者的尿液中，游离MMP-9和MMP-9/Lipocalin-2/NGAL复合物浓度都分别有所上升。

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法(Sandwich ELISA)检测样品中大鼠MMP-9的浓度，其原理见图1。大鼠MMP-9特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的大鼠MMP-9会与捕获抗体结合。当加入生物素化的抗大鼠MMP-9抗体后，生物素化抗大鼠MMP-9抗体与大鼠MMP-9结合，形成夹心的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记Streptavidin (HRP-Streptavidin)，由于生物素与链霉亲和素(Streptavidin)可以特异性地结合，因此链霉亲和素连接的HRP就会与夹心的免疫复合物连接起来而被固相捕获。最后加入显色剂TMB溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测450nm处的吸光度值就能实现定量检测。大鼠MMP-9浓度与A450值呈正比，通过绘制标准曲线，对照样品吸光度值，即可计算出样品中大鼠MMP-9浓度。

图1. 双抗体夹心ELISA原理图。

一个包装的本试剂盒，包括标准品检测，可以进行96次检测。

包装清单：

产品编号	产品名称	包装
PM735-1	大鼠MMP-9抗体预包被板	8孔×12条
PM735-2	样品分析缓冲液	5ml
PM735-3	标准品稀释液(5X)	10ml
PM735-4	大鼠MMP-9标准品	2-4瓶
PM735-5	大鼠MMP-9生物素化抗体	10ml
PM735-6	辣根过氧化物酶标记Streptavidin	10ml
PM735-7	洗涤液(20X)	30ml
PM735-8	TMB溶液	10ml
PM735-9	终止液	5ml
PM735-10	封板膜(透明)	2张
PM735-11	封板膜(白色)	2张
—	说明书	1份

保存条件：

标准品4℃保存，1-2周内有效，-20℃保存6个月内有效；试剂盒其它组分4℃保存6个月内有效。除标准品外，试剂盒其它组分严禁冻存。
更多产品简介及说明书见碧云天官网：https://www.beyotime.com/index.htm