P0540/pENTR223-FMR1人源基因质粒价格_品牌:Xybio-丁香通官网

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英文名：BC038998.1;FMRP;FRAXA;MGC87458

CAS号：详询

保质期：5年

供应商：上海烜雅生物科技有限公司

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基本信息
名称：P0540/pENTR223-FMR1人源基因质粒
别称: BC038998.1;FMRP;FRAXA;MGC87458
复制子:pUC
原核抗性:Spe
克隆菌株:DH5a
培养条件:37度

质粒属性
载体宿主：大肠杆菌
载体用途：PCR模板
基因种属：人
基因类型：cDNA
原核抗性：Spe
真核抗性：
荧光蛋白：

质粒简介
pENTR223-FMR1(BC038998.1) 是一个人源cDNA基因克隆质粒。Homo sapiens fragile X mental retardation 1, mRNA (cDNA clone IMAGE:6061671), complete cds

质粒图谱

质粒序列
LOCUS Exported 3681 bp ds-DNA circular SYN 21-JAN-2018
DEFINITION synthetic circular DNA
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3681
/organism="synthetic DNA construct"
/mol_type="other DNA"
terminator 88..115
/label=rrnB T2 terminator
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 207..293
/gene="Escherichia coli rrnB"
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
primer_bind 357..373
/label=M13 fwd
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
protein_bind 389..487
/gene="mutant version of attL"
/label=attL1
/bound_moiety="LR Clonase(TM)"
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
misc_feature 488..1378
/label=FMR1
protein_bind complement(1380..1479)
/gene="mutant version of attL"
/label=attL2
/bound_moiety="LR Clonase(TM)"
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
promoter complement(1497..1515)
/label=T7 promoter
/note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
primer_bind complement(1520..1536)
/label=M13 rev
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
CDS 1967..2758
/codon_start=1
/gene="aadA"
/product="aminoglycoside adenylyltransferase (Murphy,
1985)"
/label=Spe
/note="confers resistance to spectinomycin and
streptomycin"
/translation="MREAVIAEVSTQLSEVVGVIERHLEPTLLAVHLYGSAVDGGLKPH
SDIDLLVTVTVRLDETTRRALINDLLETSASPGESEILRAVEVTIVVHDDIIPWRYPAK
RELQFGEWQRNDILAGIFEPATIDIDLAILLTKAREHSVALVGPAAEELFDPVPEQDLF
EALNETLTLWNSPPDWAGDERNVVLTLSRIWYSAVTGKIAPKDVAADWAMERLPAQYQP
VILEARQAYLGQEEDRLASRADQLEEFVHYVKGEITKVVGK"
rep_origin 2851..3439
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
ORIGIN
1 cgacaggttt cccgactgga aagcgggcag tgagcgcaac gcaattaata cgcgtaccgc
61 tagccaggaa gagtttgtag aaacgcaaaa aggccatccg tcaggatggc cttctgctta
121 gtttgatgcc tggcagttta tggcgggcgt cctgcccgcc accctccggg ccgttgcttc
181 acaacgttca aatccgctcc cggcggattt gtcctactca ggagagcgtt caccgacaaa
241 caacagataa aacgaaaggc ccagtcttcc gactgagcct ttcgttttat ttgatgcctg
301 gcagttccct actctcgcgt taacgctagc atggatgttt tcccagtcac gacgttgtaa
361 aacgacggcc agtcttaagc tcgggcccca aataatgatt ttattttgac tgatagtgac
421 ctgttcgttg caacaaattg ataagcaatg cttttttata atgccaactt tgtacaaaaa
481 agttggcatg gaggagctgg tggtggaagt gcggggctcc aatggcgctt tctacaaggc
541 atttgtaaag gatgttcatg aagattcaat aacagttgca tttgaaaaca actggcagcc
601 tgataggcag attccatttc atgatgtcag attcccacct cctgtaggtt ataataaaga
661 tataaatgaa agtgatgaag ttgaggtgta ttccagagca aatgaaaaag agccttgctg
721 ttggtggtta gctaaagtga ggatgataaa gggtgagttt tatgtgatag aatatgcagc
781 atgtgatgca acttacaatg aaattgtcac aattgaacgt ctaagatctg ttaatcccaa
841 caaacctgcc acaaaagata ctttccataa gatcaagctg gatgtgccag aagacttacg
901 gcaaatgtgt gccaaagagg cggcacataa ggattttaaa aaggcagttg gtgccttttc
961 tgtaacttat gatccagaaa attatcagct tgtcattttg tccatcaatg aagtcacctc
1021 aaagcgagca catatgctga ttgacatgca ctttcggagt ctgcgcacta agttgtctct
1081 gataatgaga aatgaagaag ctagtaagca gctggagagt tcaaggcagc ttgcctcgag
1141 atttcatgaa cagtttatcg taagagaaga tctgatgggt ctagctattg gtactcatgg
1201 tgctaatatt cagcaagcta gaaaagtacc tggggtcact gctattgatc tagatgaaga
1261 tacctgcaca tttcatattt atggagagga tcaggatgca gtgaaaaaag ctagaagctt
1321 tctcgaattt gctgaagatg taatacaagt tccaaggaac ttagtagggt tgaagatctg
1381 cccaactttc ttgtacaaag ttggcattat aagaaagcat tgcttatcaa tttgttgcaa
1441 cgaacaggtc actatcagtc aaaataaaat cattatttgc catccagctg atatccccta
1501 tagtgagtcg tattacatgg tcatagctgt ttcctggcag ctctggcccg tgtctcaaaa
1561 tctctgatgt tacattgcac aagataaaaa tatatcatca tgcctcctct agaccagcca
1621 ggacagaaat gcctcgactt cgctgctgcc caaggttgcc gggtgacgca caccgtggaa
1681 acggatgaag gcacgaaccc agtggacata agcctgttcg gttcgtaagc tgtaatgcaa
1741 gtagcgtatg cgctcacgca actggtccag aaccttgacc gaacgcagcg gtggtaacgg
1801 cgcagtggcg gttttcatgg cttgttatga ctgttttttt ggggtacagt ctatgcctcg
1861 ggcatccaag cagcaagcgc gttacgccgt gggtcgatgt ttgatgttat ggagcagcaa
1921 cgatgttacg cagcagggca gtcgccctaa aacaaagtta aacatcatga gggaagcggt
1981 gatcgccgaa gtatcgactc aactatcaga ggtagttggc gtcatcgagc gccatctcga
2041 accgacgttg ctggccgtac atttgtacgg ctccgcagtg gatggcggcc tgaagccaca
2101 cagtgatatt gatttgctgg ttacggtgac cgtaaggctt gatgaaacaa cgcggcgagc
2161 tttgatcaac gaccttttgg aaacttcggc ttcccctgga gagagcgaga ttctccgcgc
2221 tgtagaagtc accattgttg tgcacgacga catcattccg tggcgttatc cagctaagcg
2281 cgaactgcaa tttggagaat ggcagcgcaa tgacattctt gcaggtatct tcgagccagc
2341 cacgatcgac attgatctgg ctatcttgct gacaaaagca agagaacata gcgttgcctt
2401 ggtaggtcca gcggcggagg aactctttga tccggttcct gaacaggatc tatttgaggc
2461 gctaaatgaa accttaacgc tatggaactc gccgcccgac tgggctggcg atgagcgaaa
2521 tgtagtgctt acgttgtccc gcatttggta cagcgcagta accggcaaaa tcgcgccgaa
2581 ggatgtcgct gccgactggg caatggagcg cctgccggcc cagtatcagc ccgtcatact
2641 tgaagctaga caggcttatc ttggacaaga agaagatcgc ttggcctcgc gcgcagatca
2701 gttggaagaa tttgtccact acgtgaaagg cgagatcacc aaggtagtcg gcaaataacc
2761 ctcgagccac ccatgaccaa aatcccttaa cgtgagttac gcgtcgttcc actgagcgtc
2821 agaccccgta gaaaagatca aaggatcttc ttgagatcct ttttttctgc gcgtaatctg
2881 ctgcttgcaa acaaaaaaac caccgctacc agcggtggtt tgtttgccgg atcaagagct
2941 accaactctt tttccgaagg taactggctt cagcagagcg cagataccaa atactgtcct
3001 tctagtgtag ccgtagttag gccaccactt caagaactct gtagcaccgc ctacatacct
3061 cgctctgcta atcctgttac cagtggctgc tgccagtggc gataagtcgt gtcttaccgg
3121 gttggactca agacgatagt taccggataa ggcgcagcgg tcgggctgaa cggggggttc
3181 gtgcacacag cccagcttgg agcgaacgac ctacaccgaa ctgagatacc tacagcgtga
3241 gcattgagaa agcgccacgc ttcccgaagg gagaaaggcg gacaggtatc cggtaagcgg
3301 cagggtcgga acaggagagc gcacgaggga gcttccaggg ggaaacgcct ggtatcttta
3361 tagtcctgtc gggtttcgcc acctctgact tgagcgtcga tttttgtgat gctcgtcagg
3421 ggggcggagc ctatggaaaa acgccagcaa cgcggccttt ttacggttcc tggccttttg
3481 ctggcctttt gctcacatgt tctttcctgc gttatcccct gattctgtgg ataaccgtat
3541 taccgccttt gagtgagctg ataccgctcg ccgcagccga acgaccgagc gcagcgagtc
3601 agtgagcgag gaagcggaag agcgcccaat acgcaaaccg cctctccccg cgcgttggcc
3661 gattcattaa tgcagctggc a
//
质粒菌株产品操作说明书
一、扩增流程
         收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
         1、质粒干粉（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              ①收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O去离子水溶解质粒；
              ②取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；（从第二步开始均要在超净工作台中无菌操作）
              ③加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min；
              ④6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上；（可使用本平台的平板涂布专用玻璃珠进行涂布，可以比传统涂布方法获得更多转化子）
              ⑤将平板正向培养1h，再倒置37℃培养14h。如果要求是30度则培养20h；
（菌落过多则将质粒稀释后再转化。没有菌落则加入10μl质粒转化。另不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态）
              ⑥挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
        2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
              四区划线后挑单菌落培养，酵母菌需要先液体复苏再四区划线，再挑单菌落液体培养。
        3、穿刺菌种（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              穿刺接种，液体培养后四区划线，再挑单菌落液体培养。
        4、菌落平板（冰袋运输，存于4℃，保质期7天）
              直接挑取单菌落至液体培养基中。
        5、液体质粒（冰袋运输，存于-20℃，保质期90天）
              单独提取的液体质粒收到后可直接使用。
        6、滤纸质粒（常温运输，存于-20度，90天保质期，请务必转化挑单克隆培养，不要直接使用和测序）
              收到货后将滤纸画圈部分剪下放入EP管中，加100ul无菌水将滤纸浸湿并浸泡5min，吸取5ul质粒转化，离心全涂。

二、转化图片