β-半乳糖苷酶染色

提供商 ：晶莱生物

服务名称 ：β-半乳糖苷酶染色

规格 ：切片

β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子，通过原位染色，在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。
 

实验步骤：
1. 用 2 mL D-PBSA 液洗涤细胞（如在 6 孔培养板上）。
2. 用 1 mL 固定液于室温下固定细胞 5 min。
3. 用 2 mL D-PBSA 洗涤细胞 2 次。
4. 将 1 mL 底物/染色液加入到每个培养孔内，37℃ 孵育 2 h。
5. 用 2 mL D-PBSA 液冲洗每孔细胞，在倒置显微镜下观察细胞，计数蓝染（β-gal 阳性）细胞。
6. 培养板的储存。在每孔加 1 mL 含 10% 甲醛的缓冲盐溶液，室温下固定 10 min，然后用缓冲盐溶液洗涤细胞，4℃ 储存缓冲盐溶液。

结果展示：

被β半乳糖苷酶法染色的衰老细胞

注意事项：

1.  β-Gal Fixative有一定的腐蚀性和气味，操作时请注意防护。

2. β-半乳糖苷酶染色反应依赖于特定的pH条件，不能在二氧化碳培养箱中进行染色反应。用于细胞培养的二氧化碳培养箱中较高浓度的二氧化碳会影响染色工作液的pH值，而导致染色失败。

3.  配制染色工作液时需使用聚丙烯（polypropylene）容器或玻璃容器，不宜使用聚苯乙烯（polystyrene）容器。但染色时可以在聚苯乙烯（polystyrene）容器中进行，例如普通的6孔板就可以用作染色的容器。
 

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