创新型高效液相亲和色谱柱TSKgel® FcR-IIIA-NPR

创新型高效液相亲和色谱柱TSKgel® FcR-IIIA-NPR

1. 分离原理 
抗体药物在进入人体后自动识别抗原，与免疫细胞表面的Fc受体结合，从而发挥药效，攻袭并杀死癌细胞。
近几年的研究发现，抗体Fc区的N-糖链结构会影响抗体与Fc受体之间的亲和力。与Fc受体亲和力强的抗体，其细胞杀伤力（ADCC活性）也越高，可以增强抗癌药物的活性。

根据这一机制原理，东曹公司将Fc受体之一的重组人FcγIIIA作为配基，键合到非多孔亲水性聚合物基质的填料上，并充填至PEEK色谱柱内，开发出了TSKgel FcR-IIIA-NPR色谱柱。该色谱柱可以识别抗体Fc段的糖链结构（是否有半乳糖基及其数量），并基于与FcγIIIA之间的亲和力程度实现抗体分离。

2. 应用范围 
目前为止，传统的抗体活性检测方法主要有细胞ELISA法或SPR等手段，不仅需要昂贵的设备及繁琐的操作，且实验成本高耗时较长。使用TSKgel FcR-IIIA-NPR色谱柱就可以非常简便地获得重复性良好的分析结果，且分析成本更低。
此外，该色谱柱还能应用在研发前期细胞株的筛查、细胞培养条件的优化、以及对培养过程的质量监控等环节。

3. 分离实例 
对治疗性抗体药物A进行分离后获得3个组分峰，并在制备性型FcγRIIIA亲和色谱柱上对3个组分峰进行了收集、糖链结构鉴定和ADCC活性测定（见下图）。

结果表明，该色谱柱能够基于抗体药物Fc区糖链结构的差异，实现ADCC活性不同的组分分离。糖链末端是否含有半乳糖对抗体组分的亲和保留能力有很大影响，保留越强的组分，ADCC活性也越高。