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文献和实验
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提供商 :菲优特
服务名称 :荧光定量PCR实验(realtime PCR)服务
规格 :项
定量PCR(Quantitative PCR, qPCR),也称实时PCR(Real-time PCR)或者实时定量PCR,是指借助荧光染料或荧光标记的特异性探针,在PCR指数扩增期间实时监测PCR反应体系中的荧光信号强度的变化,从而对目的基因进行定量分析的PCR检测技术。
该技术具有特异性强、灵敏度高、污染途径少、检测方法准确等特点,实现了PCR由定性到定量的飞跃,已成为国际公认的核酸定量的标准方法,广泛应用于基因表达丰度、拷贝数等研究及临床疾病检测等许多领域。
荧光定量PCR应用
相对定量PCR
绝对定量PCR
溶解曲线分析
高分率溶解曲线分析
实验步骤
核酸提取(RNA/DNA)-核酸浓度测定-反转录合成cDNA(RNA样品)-荧光定量PCR-实验结果分析
样品类型及样品量:
细胞(≥1×106);
组织(≥100 mg);
血液(≥100μl);
DNA样品(≥2μg,OD260/OD280在1.7-1.9之间,完整性好);
RNA样品(≥2 μg,OD260/OD280在1.9-2.1之间,完整性好) ;
反转录的cDNA (≥2μg,纯度在1.9-2.1之间,完整性好)。
样品保存及运输
对于定量PCR检测:
组织样品液氮速冻后保存于-80℃;
细胞可以直接-80 ℃冰箱保存或加入Trizol后保存于-80℃;
后续样品需用干冰寄送。
注:样品需要注意避免各类污染和反复冻融(以免样品降解)。
我们提供
每个样品上机检测时开展三次平行实验,保证实验结果的准确性;
交付详细的检测报告(包括实验试剂、材料仪器、实验方法、实验结果及分析等);
可提供RNA或DNA的浓度数据,及qPCR的原始数据(包括熔解曲线和扩增曲线)。
青岛菲优特检测有限公司
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