T5 Direct PCR kit (Plant) /植物组织样品直接扩增,高保真度,极速延伸(10s/kb)/PCR系列/擎科生物TSINGKE
价格: ¥1299
产品详情
文献和实验
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库存 :充足
英文名 :T5 Direct PCR kit (Plant)
保质期 :-25~-15℃保存2年
供应商 :北京擎科生物科技股份有限公司
规格 :5×1.0 mL
T5 Direct PCR kit (Plant)
植物组织样品直接扩增,高保真度,极速延伸(10s/kb)
【产品简介】
本产品是一款专为叶片、种子等植物样品直接扩增设计的试剂盒,适用于2 kb以内DNA片段的扩增。植物样品经过简单的裂解处理即可作为PCR扩增模板,无需进行基因组DNA的提取,使用更加简便。产品中所含的T5 Plant DNA Polymerase,是在具有校正活性的高保真DNA聚合酶基础上改造而来,特殊的DNA-Binding结构Sso7d蛋白结构域的融合使其具有超快的延伸速度,同时基于lacZα法测试,该酶的保真度为野生型Taq DNA聚合酶的20倍。产品中特别添加特异性增强因子SuperPrime及延伸增强因子Extension Ehancer,显著提高了扩增产量与特异性,优化的反应缓冲液可减少扩增条件探索,极大地节省时间。
本产品为2×浓度的PCR直扩预混液,已包含合适浓度的Mg2+、DNA聚合酶和dNTPs,使用时只需添加模板和引物,并补水至1×浓度即可进行反应。使用本试剂盒扩增的产物为平末端,纯化后可用于后续克隆(推荐T载体目录号:TSV-007B)、酶切、测序及文库构建等实验。
【产品特点】
无需提取基因组DNA,操作简便,省时省力;
改造的T5 Plant DNA Polymerase,具有极高的抑制物耐受度,保真度为野生型Taq DNA聚合酶的20倍;
快速扩增,延伸速度高达10 s/kb;
适用于多种植物的叶片、种子等样品。
【产品应用】
适用于植物样品的直接扩增,可用于植物基因敲除分析、转基因检测等鉴定型实验,同时适用于对保真性要求较高的基因克隆等实验。
【产品组成及保存】
-25~-15℃保存2年。
本产品是一款专为叶片、种子等植物样品直接扩增设计的试剂盒,适用于2 kb以内DNA片段的扩增。植物样品经过简单的裂解处理即可作为PCR扩增模板,无需进行基因组DNA的提取,使用更加简便。产品中所含的T5 Plant DNA Polymerase,是在具有校正活性的高保真DNA聚合酶基础上改造而来,特殊的DNA-Binding结构Sso7d蛋白结构域的融合使其具有超快的延伸速度,同时基于lacZα法测试,该酶的保真度为野生型Taq DNA聚合酶的20倍。产品中特别添加特异性增强因子SuperPrime及延伸增强因子Extension Ehancer,显著提高了扩增产量与特异性,优化的反应缓冲液可减少扩增条件探索,极大地节省时间。
本产品为2×浓度的PCR直扩预混液,已包含合适浓度的Mg2+、DNA聚合酶和dNTPs,使用时只需添加模板和引物,并补水至1×浓度即可进行反应。使用本试剂盒扩增的产物为平末端,纯化后可用于后续克隆(推荐T载体目录号:TSV-007B)、酶切、测序及文库构建等实验。
【产品特点】
无需提取基因组DNA,操作简便,省时省力;
改造的T5 Plant DNA Polymerase,具有极高的抑制物耐受度,保真度为野生型Taq DNA聚合酶的20倍;
快速扩增,延伸速度高达10 s/kb;
适用于多种植物的叶片、种子等样品。
【产品应用】
适用于植物样品的直接扩增,可用于植物基因敲除分析、转基因检测等鉴定型实验,同时适用于对保真性要求较高的基因克隆等实验。
【产品组成及保存】
-25~-15℃保存2年。
组分 | 规格 |
2×T5 Direct PCR kit(Plant) | 5×1.0 mL |
Lysis Buffer A | 1×10 mL |
Dilution Buffer B | 1×10 mL |
Positive Control Primer Mix(RbcL)(10 μM each) | 100 μL |
【操作流程】
反应体系
50 µL 体系 | |
2×T5 Direct PCR kit(Plant) | 25 µL |
10 μM Primer F | 2 µL |
10 μM Primer R | 2 µL |
Template DNA | 1~3 µL |
ddH2O | Up to 50 µL |
反应程序
温度 | 时间 | 循环次数 | ||
1 | 预变性 | 98 ℃ | 3 min | 1 cycle |
2 | 变性 | 98 ℃ | 10 s | 30~40 cycles |
退火 | Tm+3 ℃ | 10 s | ||
延伸 | 72 ℃ | 10~30 s/kb | ||
3 | 终延伸 | 72 ℃ | 3~5 min | 1 cycle |
【实例分享】
两份水稻样品a,b用4对引物进行鉴定,产物大小分别为536 bp、980 bp、1800 bp、2300 bp。分别取2 mm水稻叶片使用Lysis Buffer A裂解后取1µL裂解液进行扩增。
【问题讨论】
Q1:直扩怎么取样?
A1:T5 Direct PCR kit(Plant)适用于植物叶片及种子、微生物等的直接PCR扩增,样品无需提取基因组DNA。样品推荐取样量如下:植物叶片、根茎≤2 mm。
植物种子≤2 mm(半粒绿豆大小)外壳比较坚硬的种子可进行研磨破碎
菌落:使用牙签或枪头轻轻粘取单个菌落(菌落痕量肉眼可见即可)菌液:≤10 µL
菌丝:使用牙签或枪头轻轻刮取适量新鲜菌丝,避免挑取培养基等其他杂菌物质蘑菇等大型真菌≤2 mm
本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。
北京擎科生物科技股份有限公司
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