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文献和实验
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库存 :65
英文名 :Animal Total DNA/RNA Extraction Kit
CAS号 :无
保质期 :1年
供应商 :上海晅科生物科技有限公司
保存条件 :-20℃
规格 :50T
动物总 DNA/RNA 提取试剂盒
动物总DNA/RNA 提取试剂盒适合于快速从动物组织、血液、分泌物、排泄物等动物样品中提取高纯度的包含病毒、细菌及寄生虫等生物的总核酸。试剂盒基于硅胶柱纯化技术, 提取过程中无需使用有毒的酚氯仿抽提,也无需进行耗时的醇类沉淀,获得的核酸可直接用于PCR/RT-PCR、Sorthern 杂交/Northern 杂交、以及LAMP/RT-LAMP 等系列下游实验。
XK0712004
管 B 48 个
裂解液 30 mL
洗涤液 10 mL
洗脱液 10 mL
说明书 1 份
注意:洗涤液在初次使用前加入 40 mL 无水乙醇,并于室温保存。
二、原理
动物总 DNA/RNA 提取试剂盒基于硅胶柱纯化方式。样品在裂解液的作用下裂解,将核酸释放到裂解液中。核酸在高盐的环境下通过硅胶柱时将被吸附在硅胶柱的膜上,而蛋白质 则不被吸附而去除。吸附了核酸的滤膜经洗涤去除残留的蛋白质和盐,最后可以用DEPC 处理水洗脱滤膜上吸附的核酸,得到的核酸纯度高,可直接用于各种下游实验。三、组成
XK0712004
组分 含量
管 A 48 个管 B 48 个
裂解液 30 mL
洗涤液 10 mL
洗脱液 10 mL
说明书 1 份
注意:洗涤液在初次使用前加入 40 mL 无水乙醇,并于室温保存。
四、保质期
动物总DNA/RNA 提取试剂盒组份可在室温下(15-25℃)干燥保存18个月。长期保存时需置于2-8℃。五、注意事项
- 为确保检测结果准确,请严格按照说明书操作。
- 试剂盒内管A 与管B 为一次性用品,请勿重复使用。
- 所有用于检测的废弃物品均应放入含消毒液的废物缸内,浸泡消毒;实验结束后立 即用1% 次氯 钠或75%酒精消毒工作台。
- 实验过程中实验人员应佩戴手套、口罩,穿着实验服,避免试剂、样品与人体接触。
- 实验过程中应尽量避免接触A 管和离心管的管口,在进行操作步骤 1~4 时若有样品溶液粘在手套上或溅出,应立即更换手套并清洁溅出液;所有接触病料的物品均应 合理处置。
- 本品仅供动物病原检测实验使用,请勿用于其他用途。
六、需要准备的材料和工具
- 无菌生理盐水
- 无水乙醇
- 微量移液器(100-1000 μL,10-100 μL)
- 无DNase 和RNase 的灭菌1.5 mL 离心管
- 无DNase 和RNase 的灭菌吸头
- 涡旋振荡器
- 离心机(转速≥10,000rpm)
- 以下用品请根据检测所需的样品类型选择:
- 血液样品:采血管及针头
- 组织样品:剪刀、镊子、手术刀、均质袋或研磨棒
- 分泌物、粪便等样品:无菌棉拭子
七、操作步骤
- 样品制备(前处理):
- 血液样品:取>500 μL EDTA 抗凝血离心30 s,取200 μL上清液进入后续步骤。
- 组织样品:取0.05~1g 的组织样品,加入5~10 倍生理盐水研磨至匀浆,取 200 μL
-
- 分泌物、粪便样品:使用棉拭子在生理盐水中浸润后在采样部位翻转涂抹,完成采集 后将拭子头掰下放入含1 mL 生理盐水的离心管中涡旋30 s,取200 μL 混匀液进入后续步骤。
- 取步骤1 中制备的200 μL 样品至离心管中,加入 500 μL 裂解液,颠倒混匀,静置 5 min
- 取400 ul 上清液至新的离心管中,加入 200 μL 无水乙醇,涡旋混匀 20 s。
- 把管 A 装在2 mL 管B 中,将步骤 3 中的混匀液全部转移至A 管中,10,000 rpm 离心1 min。
- 倒弃管B 中的滤液,把管A 装回管B 中,加入600 μL 洗涤液至管 A 中,10,000 rpm 离心
- 倒弃管B 中的滤液,把管A 装回管B 中,10,000 rpm 离心2 min。
- 把管 A 装在新的离心管中。加入 50 μL洗脱液至管 A 中,静置1-2 min,10,000 rpm 离心
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