维生素B1生化试剂盒

价格： ￥480

品牌：Xkbio

货号：XK-SJH-A761

产品详情

分光光度法 50 管/48 样注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义
维生素 B1（Vitamin B1）是构成脱羧辅酶的主要成分，参与细胞代谢中的三羧酸循环，是维
持机体正常代谢必须的水溶性维生素，在生物体能量代谢中有重要的作用。

测定原理

VB1 在碱性条件下还原铁qing化钾生成亚铁qing化钾，亚铁qing化钾与 Fe³⁺在弱酸条件下生成普
鲁士蓝，在 704nm 有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、研钵、离心机、可见分光光度计、恒温水浴锅、1 mL 玻璃比色皿、蒸馏水。

试剂组成和配制

提取液：液体 35mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 1mL×1 瓶，4℃保存。试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 5mL×1 瓶，4℃避光保存。试剂四：液体 12mL×1 瓶，4℃保存。试剂五：液体 6mL×1 瓶，4℃避光保存。

样本处理

1. 组织：将样品磨碎，按照质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约
0.1g，加入 0.6mL 提取液）加入提取液，60℃浸提 30min，加蒸馏水 0.4mL，混匀后于
25℃，13000g 离心 10min，取上清测定（动物组织等蛋白含量较高的样本建议离心 20-30
分钟）。
2. 细胞：按照细胞数量（10⁴ 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500万细胞加入 0.6mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；加蒸馏水 0.4mL，混匀后于 25℃，13000g 离心 10min，取上清测定。
3. 血清：直接测定。

	空白管	测定管
样品（μL）		100
试剂一（μL）	100
试剂二（μL）	80	80
试剂三（μL）	100	100
充分混匀，80℃反应 10min
提取液（μL）	80	80
试剂四（μL）	220	220
试剂五（μL）	120	120
H₂O（μL）	300	300
充分混匀，静置 20min，于 1mL 玻璃比色皿，蒸馏水调零，测定 704nm 处吸光值，记为 A 空白管和 A 测定管，△A=A 测定管-A 空白管。