甘油三酯(TG)含量检测试剂盒

甘油三酯(TG)含量检测试剂盒

价格: ¥430

品牌:Xkbio

货号:XK-SJH-A414

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库存 :33

英文名 :Triglyceride (TG) content test kit

CAS号 :

保质期 :1年

供应商 :上海晅科生物科技有限公司

保存条件 :2-8℃

规格 :50管/48样



甘油三酯(triglyceride, TG)含量测定试剂盒

分光光度法 50T/48S

注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

TG 是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不仅是细胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。测定原理:
用异丙醇提取TG,脂蛋白酯酶水解 TG 生成甘油和脂肪酸(FFA),甘油与三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成 H2O2,过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚,生成有色化合物,在 505 nm 处有特征吸收峰。

自备仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水试剂组成和配置:
试剂一:液体 60 mL×1 瓶,4℃保存。试剂二:液体 26 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 26 mL×1 瓶,4℃避光保存。

TG 的提取:

1、 组织中 TG 的提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆,8000g,4℃离心 10min,取上清,即TG 待测液。
2、细胞、细菌中 TG 的提取:先收集 400-500 万细胞或细菌到离心管内,离心后弃上清, 加 1mL 试剂一,超声波破碎 1min(强度 20%,超声 2s,停 1s),8000g,4℃离心 10min,取上清,即 TG 待测液。
3、血清(浆)样品:直接测定。测定操作:
可见分光光度计预热 30min,调节波长到 505 nm。
试剂(μL) 空白管 测定管
样本   50
试剂一 50  
试剂二 475 475
试剂三 475 475
混匀,室温下静置 20min,于 505 nm 波长处读取吸光值,记为 A 空白和A 测定,△A=A 测定-A 空白。空白管只需测一管。

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计算公式:

标准曲线:y = 0.6522x - 0.0199; R2 = 0.9979;x:标准品浓度(mg/mL) y:吸光值差值 ΔA。
  1. 血清(浆)中甘油三酯含量计算:
TG 含量(mg/mL)=(ΔA+0.0199)÷0.6522=1.533×(ΔA+0.0199)
  1. 组织、细菌或细胞中甘油三酯含量计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
TG 含量(mg/ mg prot)= (ΔA+0.0199)÷0.6522×V 样÷(Cpr×V 样)=1.533×(ΔA+0.0199)÷Cpr (2)按样本质量计算
TG 含量(mg/ g  鲜重)=(ΔA+0.0199)÷0.6522×V 样÷(W×V 样÷V 样总)=1.533×(ΔA+0.0199)
÷ W
V 样:加入样本体积,0.01 mL;V 样总:加入试剂一体积,1 mL;W:样本质量,g; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL。

注意事项:

  1. 试剂盒中有易挥发性物质,实验过程中需佩戴手套和口罩,试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。
  2. 最低检出限为 100μg/mL。

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