PCR Kit(200次)预混液P3012

PCR Kit(200次)预混液P3012

价格: ¥200

品牌:东盛生物

货号:P3012

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产品详情

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供应商 :东盛生物

保存条件 :-20℃

库存 :大量

保质期 :2年

规格 :1 ml×5

PCR Kit

货号 规格
P3012 1 ml×5(200次,50 μl体系/次)

产品组分
P3012
2×Reaction Mix 1 ml 1支×5
Taq DNA聚合酶(2.5 U/μl)160 μl  1支
注:本产品分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的产品,PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类产品的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中包
含溴酚蓝的包装。

保存条件
-20℃保存2年。
请勿保存于-70℃,防止反复冻融导致酶活降低。

产品说明
PCR Kit是2×浓缩的PCR扩增预混和溶液,含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等PCR扩增必需组分(模板与引物除外)。使用时,仅需将反
应缓冲液与Taq DNA聚合酶按比例混合后,在扩增体系中加入模板和引物即可进行PCR,大大简化操作过程,缩短操作时间,降低污染(加样次数减少)同时,
由于体系内含有增强剂,能够显著增强PCR扩增的灵敏度。扩增产物具有3’-dA突出端。
Taq DNA聚合酶是嗜热性细菌Thermus aquaticus来源的热稳定重组型Taq DNA聚合酶,分子量为94 KD。扩增片段的长度可达5 kb(简单模板)。延伸速度为0.9~1.2 kb/ min
(70-75 ℃)。该酶具有5’→3’聚合酶活性,无3’→5’外切酶活性。

产品特点
使用方便:仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增。
快速、高效:减少加样步骤,节约时间。
可重复:降低污染和加样错误风险
DNA聚合酶用量灵活可控。

产品用途
高通量、高重复性常规PCR检测
制备TA克隆用PCR产物

活性定义
一个活性单位(U)指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在72℃、30 min内,摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。

质量控制
相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效扩增人基因组中的单拷贝基因;室温放置一周,
扩增活性无明显改变。

2×Reaction Mix的组分
100 mM KCl
20 mM Tris-Cl
3 mM MgCl2
400 mM dNTPs
溴酚蓝
dd H2O

酶贮存液
20 mM Tris-HCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
100 mM KCl
0.5 % TW 20
0.5 % NP 40
50 % Glycerol

应用举例(PCR Taq Mix Kit即PCR Kit)
注:以下反应举例为50 μl标准PCR体系,仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化,确定最佳反应条件。

以λDNA为模板,扩增1kb片段
λDNA(2.5 ng/μl) 1 μl
Primer 1(10 μM ) 2 μl
Primer 2(10 μM) 2 μl
2×Reaction Mix 25 μl
Taq DNA聚合酶(2.5 U/μl) 0.5μl
dd H2O 补足至50 μl

反应条件
95℃ 3 min
95℃ 30 sec
55~68℃ 30 sec 30 Cycles
72℃ 1 min
72℃ 5 min


备注
1 建议在冰上配置PCR 反应液后,再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性,减少非特异性扩增,得到良好的PCR结果。
2 模板DNA推荐用量(50 μl PCR反应体系)
人类基因组DNA 0.1 – 1 μg
λDNA 0.5 – 5 ng
质粒DNA 0.1 – 10 ng
大肠杆菌DNA 10 – 100 ng
3 如进行PCR扩增后,除目的条带外,还伴随其他杂带,建议适当减少体系中的Taq酶用量,以增加PCR扩增反应的特异性。

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