GV3101 Chemically Competent Cell/感受态系列/农杆菌感受态细胞,适用于拟南芥、玉米、烟草、土豆等植物转基因操作,转化效率>10^4 cfu/μg/擎科生物TSINGKE
价格: ¥199
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文献和实验
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英文名 :GV3101 Chemically Competent Cell
供应商 :北京擎科生物科技股份有限公司
保存条件 :-83~-78°C保存 6 个月
规格 :10×100 µL
GV3101 Chemically Competent Cell
农杆菌感受态细胞,适用于拟南芥、玉米、烟草、土豆等植物转基因操作,转化效率>10^4 cfu/μg
【产品简介】
根癌农杆菌GV3101染色体背景为C58,核基因上含有筛选标签——利福平抗性基因rif;该菌株携带的pMP90(pTiC58DT-DNA)是一种无自身转运功能的胭脂型Ti质粒,质粒上含有的vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移;同时pMP90质粒含有的gent筛选标签使GV3101菌株具有庆大霉素抗性;常用于拟南芥、烟草、土豆、玉米等植物的转基因操作。本制品经优化的感受态制备工艺制备而成,使用pCAMBIA2301质粒DNA检测,转化效率可达1×104 cfu/μg。
【产品特点】
适用于拟南芥、烟草、土豆、玉米等植物的转基因操作;
具有利福平抗性和庆大霉素抗性。
【基因型】
C58(rifR)Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) (gentR) Nopaline
【产品组成及保存】
-83~-78℃保存 6 个月。
组分 | 规格 |
GV3101 | 10 ×100 µL |
pCAMBIA2301(control vector) | 10 µL(10 ng/ µL) |
【操作流程】
加入目的 DNA(质粒或连接产物),轻轻混匀后进行如下步骤:
【注意事项】
实验过程轻柔操作;
质粒用量通常为0.01~1 μg,可通过用量梯度预试验确定合适的质粒用量;
质粒不纯或存在乙醇等有机溶剂的污染会影响其转化效率;
利福平推荐工作浓度为20~25 μg/mL,过高的抗生素浓度会影响其生长速率和转化效率。本公司计算感受态转化效率所用的是20 μg/mLrif和50 μg/mL kana的YEB平板。
【问题讨论】
Q1:如何配置利福平及庆大霉素?
A1:利福平的浓度控制在20~25 µg/mL之间,过高的抗生素浓度会影响其生长速率和转化效率。本公司计算感受态转化效率所用的是20 µg/mL利福平和50 µg/mL卡那霉素的YEB平板。抗生素配方如下:
抗生素 | 配方 | 储存浓度 | 工作浓度 |
利福平(rif) | DMSO 溶解,0.22 μm 滤膜过滤除菌 | 20 mg/mL | 20 μg/mL |
庆大霉素(gent) | 双蒸水溶解,0.22 μm 滤膜过滤除菌 | 20 mg/mL | 40 μg/mL |
硫酸卡那霉素(kana) | 双蒸水溶解,0.22 μm 滤膜过滤除菌 | 50 mg/mL | 50 μg/mL |
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