GV3101 Chemically Competent Cell/感受态系列/农杆菌感受态细胞,适用于拟南芥、玉米、烟草、土豆等植物转基因操作,转化效率>10^4 cfu/μg/擎科生物TSINGKE

GV3101 Chemically Competent Cell/感受态系列/农杆菌感受态细胞,适用于拟南芥、玉米、烟草、土豆等植物转基因操作,转化效率>10^4 cfu/μg/擎科生物TSINGKE

价格: ¥199

品牌:擎科生物 品牌认证

货号:TSC-A01

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产品详情

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库存 :充足

英文名 :GV3101 Chemically Competent Cell

供应商 :北京擎科生物科技股份有限公司

保存条件 :-83~-78°C保存 6 个月

规格 :10×100 µL

GV3101 Chemically Competent Cell
农杆菌感受态细胞,适用于拟南芥、玉米、烟草、土豆等植物转基因操作,转化效率>10^4 cfu/μg


【产品简介】
根癌农杆菌GV3101染色体背景为C58,核基因上含有筛选标签——利福平抗性基因rif该菌株携带的pMP90(pTiC58DT-DNA)是一种无自身转运功能的胭脂型Ti质粒,质粒上含有的vir基因是T-DNA插入植物基因组必需的元件,可以帮助转入的双元载体T-DNA顺利转移;同时pMP90质粒含有的gent筛选标签使GV3101菌株具有庆大霉素抗性;常用于拟南芥、烟草、土豆、玉米等植物的转基因操作。本制品经优化的感受态制备工艺制备而成,使用pCAMBIA2301质粒DNA检测,转化效率可达1×104 cfu/μg

【产品特点】
适用于拟南芥、烟草、土豆、玉米等植物的转基因操作;
具有利福平抗性和庆大霉素抗性。

【基因型】
C58(rifR)Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) (gentR) Nopaline

【产品组成及保存】
-83~-78℃保存 6 个月。

组分 规格
GV3101 10 ×100 µL
pCAMBIA2301(control vector) 10 µL(10 ng/ µL)

【操作流程】
加入目的 DNA(质粒或连接产物),轻轻混匀后进行如下步骤:


【注意事项】
实验过程轻柔操作
质粒用量通常为0.01~1 μg可通过用量梯度预试验确定合适的质粒用量
质粒不纯或存在乙醇等有机溶剂的污染会影响其转化效率
利福平推荐工作浓度为20~25 μg/mL,过高的抗生素浓度会影响其生长速率和转化效率。本公司计算感受态转化效率所用的是20 μg/mLrif和50 μg/mL kana的YEB平板。

【问题讨论】
Q1:如何配置利福平及庆大霉素?
A1:利福平的浓度控制在20~25 µg/mL之间,过高的抗生素浓度会影响其生长速率和转化效率。本公司计算感受态转化效率所用的是20 µg/mL利福平和50 µg/mL卡那霉素的YEB平板。抗生素配方如下:
抗生素 配方 储存浓度 工作浓度
利福平(rif) DMSO 溶解,0.22 μm 滤膜过滤除菌 20 mg/mL 20 μg/mL
庆大霉素(gent) 双蒸水溶解,0.22 μm 滤膜过滤除菌 20 mg/mL 40 μg/mL
硫酸卡那霉素(kana) 双蒸水溶解,0.22 μm 滤膜过滤除菌 50 mg/mL 50 μg/mL


 

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