Trelief® Mouse Direct PCR Kit (for Genotyping)/PCR系列/小鼠组织样品直接扩增，适用于多重PCR/擎科生物TSINGKE

价格： ￥680

品牌：擎科生物品牌认证

货号：TSE014

产品详情

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库存：充足

英文名：Trelief® Mouse Direct PCR Kit (for Genotyping)

供应商：北京擎科生物科技股份有限公司

保存条件：Lysis Buffer 2~8°C保存，其余组分-25-15°C保存

规格：5×1.0 mL

Trelief ^®Mouse Direct PCR Kit (for Genotyping)

小鼠组织样品直接扩增，适用于多重PCR

【产品简介】
本产品是一款专为小鼠组织直接扩增设计的试剂盒，小鼠组织（尾巴、耳朵、脚趾等）经过简单的裂解处理即可作为PCR扩增模板，无需过夜消化，酚氯仿抽提或柱式纯化等操作，使用更加简便。产品适用干2 kb以内目的片段的扩增以及3对引物以内的多重PCR反应。
本产品所提供的2×Mouse Direct PCR Mix中，包含经过基因工程改造的DNA聚合酶、合适浓度的Mg2⁺、dNTPs以及优化的缓冲体系，具有极高的扩增效率和抑制物耐受度，使用时只需加入模板和引物，并补水至1×即可进行PCR反应。

【产品特点】
无需复杂的基因组提取步骤，操作简便，省时省力；
改造的DNA聚合酶，具有极高的扩增效率和良好的抑制物耐受度；
添加特异性增强因子，扩增产物具有高特异性；
适用于多种小鼠组织的直接扩增。

【产品应用】
用于小鼠基因敲除分析、转基因检测、基因分型等。

【产品组成及保存】
-25~-15℃保存2年。

组分	规格
2×Mouse Direct PCR Mix	5×1.0 mL
Lysis Buffer	4×20 mL
DNA Release	2×800 μL
Positive Control Primer Mix(10 uM each)	100 μL

【操作流程】

反应体系

组分	25 μL 体系	50 μL 体系	终浓度
2×Mouse Direct PCR Mix	12.5 μL	25 μL	1×
上游引物（10 μM）	1 μL	2 μL	0.4 μM
下游引物（10 μM）	1 μL	2 μL	0.4 μM
裂解产物	0.5~1 μL	1~2 μL
灭菌水	Up to 25 μL	Up to 50 μL

反应程序

		温度	时间	循环数
1	预变性	94℃	5 min	1 cycle
2	变性	94℃	30 s	35 cycles
	退火	Tm+3~5℃	30 s
	延伸	72℃	30 s/kb
3	终延伸	72℃	7 min	1 cycle

【问题讨论】
Q1：使用本产品阳性对照片段扩增正常，但目的片段无条带或条带弱？
A1:

可能原因	解决方法
引物质量差	做纯化的基因组模版的对照反应，验证引物质量，若任然无法扩展可重新设计合成引物
退火温度过高	做退火温度梯度 PCR（推荐以2℃）为梯度，摸索最佳反应条件
延伸时间过短	增加延伸时间
DNA 模板量不足	适当增加模板用量或增加循环数

【实例分享】

1. 使用擎科Trelief ^®Mouse Direct PCR Kit (for Genotyping) 进行小鼠尾巴的直接扩增，检测其对不同大小目的片段（300 bp~2500 bp）的扩增效果。

2. 使用Trelief^®Mouse Direct PCR Kit (for Genotyping) 进行扩增实验，检测其对小鼠不同组织的扩增效果 ( 两对引物 )。

3. 使用 Trelief^®Mouse Direct PCR Kit (for Genotyping) 进行直接扩增（A）及小鼠组织基因组 DNA 用 Trelief ^®Mouse Direct PCR Kit (for Genotyping) 中的 PCR Mix 进行扩增（B），比较双重、三重引物扩增效果。