禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)

禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)

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品牌:研生

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规格 :50T

禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA,设计并合成引物,完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析,提供实验报告给您。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
    10×PCR buffer 
                  5 μl     dNTP mix (2mM)   
          4 μl     引物1(10pM)   
              2 μl     引物2(10pM) 
                2 μl     Taq酶 (2U/μl)
                1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl) 
  1 μl      加ddH2O至 50 μl
   视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
产品特点:
灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强

白介素4诱导蛋白1(IL4I1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interleukin 4 Induced Protein 1 (IL4I1)    96T    Mus musculus (Mouse)
干扰素诱导跨膜蛋白2(IFITM2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interferon Induced Transmembrane Protein 2 (IFITM2)    96T    Homo sapiens (Human)
干扰素诱导跨膜蛋白2(IFITM2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interferon Induced Transmembrane Protein 2 (IFITM2)    96T    Mus musculus (Mouse)
干扰素诱导跨膜蛋白2(IFITM2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interferon Induced Transmembrane Protein 2 (IFITM2)    96T    Rattus norvegicus (Rat)
干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interferon Induced Transmembrane Protein 3 (IFITM3)    96T    Homo sapiens (Human)
干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interferon Induced Transmembrane Protein 3 (IFITM3)    96T    Mus musculus (Mouse)
干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interferon Induced Transmembrane Protein 3 (IFITM3)    96T    Rattus norvegicus (Rat)
含跨膜Emp24蛋白运输域蛋白1(TMED1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Transmembrane Emp24 Protein Transport Domain Containing Protein 1 (TMED1)    96T    Homo sapiens (Human)
含跨膜Emp24蛋白运输域蛋白1(TMED1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Transmembrane Emp24 Protein Transport Domain Containing Protein 1 (TMED1)    96T    Mus musculus (Mouse)
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三角形四肽重复干扰素诱导蛋白1(IFIT1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interferon Induced Protein With Tetratricopeptide Repeats 1 (IFIT1)    96T    Homo sapiens (Human)
三角形四肽重复干扰素诱导蛋白1(IFIT1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interferon Induced Protein With Tetratricopeptide Repeats 1 (IFIT1)    96T    Mus musculus (Mouse)
禽网状内皮组织增殖病病毒(REV)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)三角形四肽重复干扰素诱导蛋白1(IFIT1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interferon Induced Protein With Tetratricopeptide Repeats 1 (IFIT1)    96T    Rattus norvegicus (Rat)
三角形四肽重复干扰素诱导蛋白2(IFIT2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interferon Induced Protein With Tetratricopeptide Repeats 2 (IFIT2)    96T    Homo sapiens (Human)
三角形四肽重复干扰素诱导蛋白2(IFIT2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interferon Induced Protein With Tetratricopeptide Repeats 2 (IFIT2)    96T    Mus musculus (Mouse)
三角形四肽重复干扰素诱导蛋白2(IFIT2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interferon Induced Protein With Tetratricopeptide Repeats 2 (IFIT2)    96T    Rattus norvegicus (Rat)
胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 1 (IGF2BP1)    96T    Homo sapiens (Human)
胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 1 (IGF2BP1)    96T    Mus musculus (Mouse)
胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白1(IGF2BP1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 1 (IGF2BP1)    96T    Rattus norvegicus (Rat)
胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 2 (IGF2BP2)    96T    Homo sapiens (Human)
胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 2 (IGF2BP2)    96T    Mus musculus (Mouse)
胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 2 (IGF2BP2)    96T    Rattus norvegicus (Rat)
胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3 (IGF2BP3)    96T    Homo sapiens (Human)
胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3 (IGF2BP3)    96T    Mus musculus (Mouse)
胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白3(IGF2BP3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3 (IGF2BP3)    96T    Rattus norvegicus (Rat)
白介素1受体样蛋白2(IL1RL2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interleukin 1 Receptor Like Protein 2 (IL1RL2)    96T    Homo sapiens (Human)
白介素1受体样蛋白2(IL1RL2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interleukin 1 Receptor Like Protein 2 (IL1RL2)    96T    Mus musculus (Mouse)
白介素1受体样蛋白2(IL1RL2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interleukin 1 Receptor Like Protein 2 (IL1RL2)    96T    Rattus norvegicus (Rat)
Aristaless样同源框蛋白4(ALX4)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Aristaless Like Homeobox Protein 4 (ALX4)    96T    Homo sapiens (Human)
Aristaless样同源框蛋白4(ALX4)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Aristaless Like Homeobox Protein 4 (ALX4)    96T    Mus musculus (Mouse)
Aristaless样同源框蛋白4(ALX4)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Aristaless Like Homeobox Protein 4 (ALX4)    96T    Rattus norvegicus (Rat)
白介素1家族成员9(IL1F9)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interleukin 1 Family, Member 9 (IL1F9)    96T    Homo sapiens (Human)
白介素1家族成员9(IL1F9)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interleukin 1 Family, Member 9 (IL1F9)    96T    Mus musculus (Mouse)
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泛素交叉反应蛋白(UCRP)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Ubiquitin Cross Reactive Protein (UCRP)    96T    Homo sapiens (Human)
实时荧光定量PCR:
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的: 1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。 2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。 外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确,重现性定量方法,已得到全世界的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
定量PCR方法:
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中,待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增(其中一个引物为荧光标记)。扩增后用内切酶消化PCR产物,竞争性模板的产物被酶解为两个片段,而待测模板不被酶切,可通过电泳或高效液相将两种产物分开,分别测定荧光强度,根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。 b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物,内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记,下游引物不标记。在模板扩增的同时,内标也被扩增。在PCR产物中,由于内标与靶模板的长度不同,二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来,分别测定其荧光强度,以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物,扩增产物被固相板上特异的探针所结合,再加入抗di高辛或生物素酶标抗体-辣根过氧化物酶结合物,最终酶使底物显色。常规的PCR-ELISA法只是定性实验,若加入内标,作出标准曲线,也可实现定量检测目的。

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