肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)

肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)

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规格 :50T

肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

HESMC cDNA人食道平滑肌细胞cDNA20 reactions
HIMEC cDNA人肠微血管内皮细胞cDNA20 reactions
HISMC cDNA人肠平滑肌细胞cDNA20 reactions
HCSMC cDNA人结肠平滑肌细胞cDNA20 reactions
HPMEC cDNA人肺微血管内皮细胞cDNA20 reactions
HPAEC cDNA人肺动脉内皮细胞cDNA20 reactions
HPASMC cDNA人肺动脉平滑肌细胞cDNA20 reactions
HPAF cDNA人肺动脉成纤维细胞cDNA20 reactions
HPAEpiC cDNA人肺泡上皮细胞cDNA20 reactions
HBEpiC cDNA人支气管上皮细胞cDNA20 reactions
HTEpiC cDNA人气管上皮细胞cDNA20 reactions
HSAEpiC cDNA人小气道上皮细胞cDNA20 reactions
肠集聚性大肠杆菌(EAEC)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)HPF cDNA人肺成纤维细胞cDNA20 reactions
HBSMC cDNA人支气管平滑肌细胞cDNA20 reactions
HTSMC cDNA人气管平滑肌细胞cDNA20 reactions
HSkMC cDNA人骨骼肌细胞cDNA20 reactions
HSkMSC cDNA人骨骼肌卫星细胞cDNA20 reactions
HSkMM cDNA人骨骼肌成肌细胞cDNA20 reactions
HRGEC cDNA人肾小球内皮细胞cDNA20 reactions
HRPTEpiC cDNA人肾近曲小管上皮细胞cDNA20 reactions
HRCEpiC cDNA人肾皮质上皮细胞cDNA20 reactions
HREpiC cDNA人肾上皮细胞cDNA20 reactions
HRMC cDNA人肾系膜细胞cDNA20 reactions
HBdSMC cDNA人膀胱平滑肌细胞cDNA20 reactions
HUC cDNA人尿道上皮细胞cDNA20 reactions
HBdSF cDNA人膀胱基质成纤维细胞cDNA20 reactions
HPEpiC cDNA人前列腺上皮细胞cDNA20 reactions
HPrF cDNA人前列腺成纤维细胞cDNA20 reactions
HPSMC cDNA人前列腺平滑肌细胞cDNA20 reactions
HCO cDNA人颅骨造骨细胞cDNA20 reactions
HS cDNA人滑膜细胞cDNA20 reactions
HNPC cDNA人髓核细胞cDNA20 reactions
HHSEC cDNA人肝窦内皮细胞cDNA20 reactions
HIBEpiC cDNA人肝内胆管上皮细胞cDNA20 reactions
HH cDNA人肝细胞cDNA20 reactions
HHSteC cDNA人肝脏星形细胞cDNA20 reactions
HCMEC cDNA心脏微血管内皮细胞cDNA20 reactions
HAEC cDNA人主动脉内皮细胞cDNA20 reactions
HASMC cDNA人主动脉平滑肌细胞cDNA20 reactions
HCM cDNA人心肌细胞cDNA20 reactions
HCM-a cDNA人心肌细胞-成人cDNA20 reactions
HCF cDNA人心脏成纤维细胞cDNA20 reactions
HCF-av cDNA人心肌细胞-成人心室cDNA20 reactions
HCF-aa cDNA人心肌细胞-成人心房cDNA20 reactions
HCEpiC cDNA人角膜上皮细胞cDNA20 reactions使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1.样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。 2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
荧光定量PCR原理:
荧光定量PCR最早称TaqMan PCR,后来也叫Real-Time PCR,是美国PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出来的一种新的核酸定量技术。该技术是在常规PCR基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。其原理:随着PCR反应的进行,PCR反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光强度信号,这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。 一般而言,荧光扩增曲线可以分成三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期。在荧光背景信号阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物已不再呈指数级的增加,PCR 的终产物量与起始模板量之间没有线性关系,根据最终的 PCR 产物量也不能计算出起始 DNA 拷贝数。只有在荧光信号指数扩增阶段, PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系,我们可以选择在这个阶段进行定量分析。为了定量和比较的方便,在实时荧光定量 PCR 技术中引入了两个非常重要的概念:荧光阈值和 CT值。

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