加强型膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液,碱性)    P1652  厂家直销,提供OEM定制服务,大包装更优惠

加强型膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液,碱性) P1652 厂家直销,提供OEM定制服务,大包装更优惠

价格: ¥150 - 430

品牌:普利莱 品牌认证

货号:P1652-100/500

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库存 :大量

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保质期 :一年

供应商 :普利莱

保存条件 : 室温

规格 :100ml/500ml

加强型膜再生液(抗体去除液、抗体剥离液,碱性)      P1652
描述:膜再生液,也称做抗体剥离液体、一抗二抗去除液。允许对同一张膜进行多次Western Blot检测。在室温条件下,将用过的膜浸泡在膜再生液中孵育适当时间,能够选择性清除与膜抗原结合的第一抗体及第二抗体,但不影响电转移到膜上的蛋白。随后可以使用不同的抗体进行下一轮Western Blot实验,可利用同一张膜进行多次蛋白检测。不仅适宜用少量样品多次检测多种不同蛋白,即使样品量并不匮乏,采用这种多次检测同一张膜上的蛋白的策略,能省去给药处理、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。
适用:   硝酸纤维素膜或PVDF膜。使用前膜可以保存在PBSTBS缓冲液,也可以室温干燥保存数月。干的PVDF膜应该先用甲醇泡5分钟。
安全性:无毒无味。按照普通化学品安全规范进行操作和处置。
储存:  室温保存,一年有效。温度过低可能出现浑浊。
操作步骤:
  1. 将膜充分浸泡于适当体积的再生液中,于摇床上室温孵育6~8分钟。孵育时间的长短应参考后面的说明进行优化。
  2. 用镊子取出膜,用自备Western Blot洗涤缓冲液或普利莱封闭洗涤缓冲液(B1009)洗膜三次,每次8分钟。
  3. 此时膜上抗体已去除,膜已再生。用脱脂奶粉或BSA封闭,进行下一轮Western Blot实验。
说明:
1. 膜再生或Stripping的实质是在不影响膜上结合的抗原的条件下,将与抗原分子结合的一抗和二抗洗脱下来。有许多因素影响抗体从膜上的洗脱,如膜的类型、抗体类型和浓度及其与抗原结合特性等。按下面的说明优化再生液中孵育膜的时间至关重要。
2. 确定膜上抗体是否去除与优化再生液中孵育膜的时间:用ECL工作液孵育再生后的膜约1分钟,然后进行X光胶片曝光并显影,可确定膜上的抗体是否完全去除。如显示条带,表明抗体未完全去除,应继续将膜浸泡在再生液中孵育。然后再次ECL 检查膜上抗体是否去除。重复此步骤直到抗体完全去除并确定最佳孵育时间。
3. 由于至今尚不清楚的原因,使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用BSA封闭的膜上的抗体更容易被Strip下来。因此准备进行Strip的膜,应该使用脱脂奶粉而不是BSA封闭。
4. 尽量避免使用干燥保存的膜,因为干的膜上的抗体很难被Strip干净















 

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