乳酸杆菌属通用PCR试剂盒

库存 ：大量

英文名 ：Lactococcus spp.

保质期 ：一年

供应商 ：上海钰博生物科技有限公司

保存条件 ： -20℃保存

规格 ：50次

产品简介：
乳酸杆菌属（Lactococcus spp.）是指能使糖类发酵产生乳酸的细菌，酸牛奶中有此菌。是一群生活在机体内益于宿主健康的微生物，它维护人体健康和调节免疫功能的作用已被广泛认可，它不仅是研究分类、生化、遗传、分子生物学和基因工程的理想材料（在理论上具有重要的学术价值），而且在工业、农牧业、食品和医药等与人类生活密切相关的重要领域具有极高的应用价值，因此乳酸杆菌属检测具有重要的意义。本试剂盒根据荧光定量PCR原理开发，它具有下列特点：
1.即开即用，用户只需要提供细菌DNA模板。
2.引物经过精心优化，专一性强，只扩增乳酸杆菌属。
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4.PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5.本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。
6.本产品只能用于科研。

规格及成分：

成 份	编号	十孔盒包装
PCR MagicMix 3.0	90805	1 mL（亮黄盖
超纯水	100935	100 μL（白盖）
乳酸杆菌属通用PCR 引物混合液	13-32300yw	100 μL（黄盖）
乳酸杆菌属PCR阳性对照	13-32300pc	50次（试用装）
天净沙DNA释放剂试用装	130982	20 次（1mL、绿盖）
使用手册	13-32300sc	1份

运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样本DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1.如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌DNAout或柱式细菌DNAout。本试剂盒免费赠送50次免DNA提取的天净沙DNA释放剂，本产品的裂解液可以直接作为PCR模板，省略了DNA提取步骤。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：

成分	样品管 N+2 个	PCR 阴性对照	PCR 阳性对照
PCR MagicMix 3.0	各 20 μL	20 μL	20 μL
乳酸杆菌属通用PCR 引物混合液	各 2 μL	2 μL	2 μL
N+2 个样品 DNA 模板	各 18 μL	-	-
样品制备阴性对照	-	18 μL	-
PCR 阳性对照	-	-	18 μL

4. 按下表设置 PCR 反应：

过程	温度	时间
预变性	94℃	5 min
PCR 反应 （35 个循环）	94℃	20 sec
	58℃	20 sec
	72℃	30 sec
最后延伸	72℃	10 min

三、电泳检测
5. 取10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为208bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。