转基因品系大豆G94-19探针法qPCR试剂盒

保存条件 ：低温冷藏

保质期 ：详见说明书

英文名 ：详见说明书

库存 ：100

供应商 ：上海一研

规格 ：50T

转基因品系大豆G94-19探针法qPCR试剂盒实时定量PCR：
①β-actin阳性模板的标准梯度制备 阳性模板的浓度为1011，反应前取3μl按10倍稀释（加水27μl并充分混匀）为1010，依次稀释至109、108、107、106、105、104，以备用。
②反应体系如下：
标准品反应体系
序号  反应物  剂量
1   SYBR Green 1 染料  10μl
2  阳性模板上游引物F  0.5μl
3  阳性模板下游引物R  0.5μl
4  dNTP  0.5μl
5  Taq酶  1μl
6  阳性模板DNA  5μl
7  ddH2O  32.5μl
8  总体积  50μl
轻弹管底将溶液混合，6000rpm短暂离心。
基因反应体系：
序号  反应物  剂量
1  SYBR Green 1 染料  10μl
2  内参照上游引物F  0.5μl
3  内参照下游引物R  0.5μl
4  dNTP  0.5μl
5  Taq酶  1μl
6  待测样品cDNA  5μl
7  ddH2O  32.5μl
8  总体积  50μl
ELISA Kit for Visceral Adipose Tissue Derived Serine Protease Inhibitor (Vaspin)    48T/96T    Rattus norvegicus (Rat)
内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制因子(Vaspin)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Visceral Adipose Tissue Derived Serine Protease Inhibitor (Vaspin)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
转基因品系大豆G94-19探针法qPCR试剂盒凝血酶原片段F1+2(F1+2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Prothrombin Fragment 1+2 (F1+2)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
β-位淀粉样前体蛋白裂解酶1(βACE1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Beta-Site APP Cleaving Enzyme 1 (bACE1)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)    48T/96T    Bos taurus; Bovine (Cattle)
葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase (G6PD)    48T/96T    Bos taurus; Bovine (Cattle)
丝氨酸蛋白酶1(PRSS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Protease, Serine 1 (PRSS1)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
磷酸烯醇式酸羧激酶1(PCK1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Phosphoenolpyruvate Carboxykinase 1, Soluble (PCK1)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
心磷脂合酶(CLS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Cardiolipin Synthase (CLS)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
肾上腺髓质素(ADM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Adrenomedullin (ADM)    48T/96T    Canis familiaris; Canine (Dog)
白介素2受体β(IL2Rβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Interleukin 2 Receptor Beta (IL2Rb)    48T/96T    Rhesus monkey (Simian)
转录因子20(TCF20)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Transcription factor 20 (TCF20)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
热休克转录因子1(HSF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Heat Shock Transcription Factor 1 (HSF1)    48T/96T    Rattus norvegicus (Rat)
白介素18(IL18)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18)    48T/96T    Canis familiaris; Canine (Dog)
干扰素α(IFNα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Interferon Alpha (IFNa)    48T/96T    Canis familiaris; Canine (Dog)
蛋白酪氨酸磷酸酶受体H(PTPRH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type H (PTPRH)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for 2,3-Bisphosphoglycerate (2,3-BPG)    48T/96T    General
CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for CCAAT/Enhancer Binding Protein Beta (CEBPb)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
Toll样受体9(TLR9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Toll Like Receptor 9 (TLR9)    48T/96T    Rattus norvegicus (Rat)
Toll样受体9(TLR9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Toll Like 轻弹管底将溶液混合，6000rpm短暂离心。
③制备好的阳性标准品和检测样本同时上机，反应条件为：93℃　2分钟，然后93℃ 1分钟，55℃ 2分钟，共40个循环。

PCR特异性：
1.primers design
这是重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其它序列退火的primer要符合下面一些条件：
1)足够长，18～24bp，以保证特异性，当然，不是说越长越好，太长的primer同样会降低特异性，并且降低产量；
2)GC%，40%~60%；
3)5'端和中间序列要多GC，以增加稳定性；
4)避免3'端GCrich，个BASE不要有GC，或者5个有3个不要是GC。
5)避免3'端的互补，否则，容易造成DIMER；
6)避免3'端的错配；
7)避免内部形成二级结构；
8)附加序列(RT site，Promoter sequence)加到5'端，在算Tm值时不算，但在检测互补和二级结构要加上它们；
9)使用兼并primer时，要参考密码子使用表，注意：生物偏好性，不要在3'端使用兼并primer，并使用较高的primer浓度(1μM～3μM)；
10)学会使用一种design software，PP5，Oligo6，DNA star，Vector NTI，Online design et al。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括绝对定量和相对定量）和定性分析。 主要服务：DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。