转基因品系大豆A2704-12染料法qPCR试剂盒价格

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供应商：上海一研

规格：50T

转基因品系大豆A2704-12染料法qPCR试剂盒实时定量PCR：
①β-actin阳性模板的标准梯度制备阳性模板的浓度为1011，反应前取3μl按10倍稀释（加水27μl并充分混匀）为1010，依次稀释至109、108、107、106、105、104，以备用。
②反应体系如下：
标准品反应体系
序号反应物剂量
1   SYBR Green 1 染料 10μl
2 阳性模板上游引物F 0.5μl
3 阳性模板下游引物R 0.5μl
4 dNTP 0.5μl
5 Taq酶 1μl
6 阳性模板DNA 5μl
7 ddH2O 32.5μl
8 总体积 50μl
轻弹管底将溶液混合，6000rpm短暂离心。
基因反应体系：
IQ Motif Containing GTPase Activating Protein 1 (IQGAP1)   48T/96T   Mus musculus (Mouse)
微管蛋白α3A(TUBα3A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Tubulin Alpha 4A (TUBa4A)   48T/96T   Mus musculus (Mouse)
甲状腺激素受体交互子6(TRIP6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Thyroid Hormone Receptor Interactor 6 (TRIP6)   48T/96T   Mus musculus (Mouse)
葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Glucose Transporter 1 (GLUT1)   48T/96T   Rattus norvegicus (Rat)
70kDa热休克蛋白1A(HSPA1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 1A (HSPA1A)   48T/96T   Bos taurus; Bovine (Cattle)
型胆碱受体α7(CHRNα7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Alpha 7 (CHRNa7)   48T/96T   Homo sapiens (Human)
促甲状腺素受体(TSHR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Thyroid Stimulating Hormone Receptor (TSHR)   48T/96T   Rattus norvegicus (Rat)
型胆碱受体α3(CHRNα3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Alpha 3 (CHRNa3)   48T/96T   Homo sapiens (Human)
腭/肺/鼻上皮癌关联蛋白(PLUNC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Palate/Lung And Nasal Epithelium Associated Protein (PLUNC)   48T/96T   Homo sapiens (Human)
GLI家族锌指蛋白1(GLI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for GLI Family Zinc Finger Protein 1 (GLI1)   48T/96T   Homo sapiens (Human)
非转移细胞1表达NM23A蛋白(NME1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Non Metastatic Cells 1, Protein NM23A Expressed In (NME1)   48T/96T   Rattus norvegicus (Rat)
90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Alpha A1 (HSP90aA1)   48T/96T   Bos taurus; Bovine (Cattle)
成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Fibroblast Activation Protein Alpha (FAPa)   48T/96T   Rattus norvegicus (Rat)
黑素瘤缺乏因子2(AIM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Absent In Melanoma 2 (AIM2)   48T/96T   Homo sapiens (Human)
Apelin 13蛋白(AP13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Apelin 13 (AP13)   48T/96T   Rattus norvegicus (Rat)
跨膜4域亚家族A成员1(MS4A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Membrane Spanning 4 Domains Subfamily A, Member 1 (MS4A1)   48T/96T   Homo sapiens (Human)
转基因品系大豆A2704-12染料法qPCR试剂盒铜离子转运ATP酶β肽(ATP7β)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for ATPase, Cu++ Transporting Beta Polypeptide (ATP7b)   48T/96T   Homo sapiens (Human)
葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Glucose Transporter 3 (GLUT3)   48T/96T   Rattus norvegicus (Rat)
脑指蛋白(BFP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Brain Finger Protein (BFP)   48T/96T   Mus musculus (Mouse)
肿瘤坏死因子受体超家族成员4(TNFRSF4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)   ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 4 (TNFRSF4)   48T/96T   Mus musculus (Mouse)
序号反应物剂量
1 SYBR Green 1 染料 10μl
2 内参照上游引物F 0.5μl
3 内参照下游引物R 0.5μl
4 dNTP 0.5μl
5 Taq酶 1μl
6 待测样品cDNA 5μl
7 ddH2O 32.5μl
8 总体积 50μl
轻弹管底将溶液混合，6000rpm短暂离心。
③制备好的阳性标准品和检测样本同时上机，反应条件为：93℃　2分钟，然后93℃ 1分钟，55℃ 2分钟，共40个循环。

PCR特异性：
1.primers design
这是重要的一步。理想的，只同目的序列两侧的单一序列而非其它序列退火的primer要符合下面一些条件：
1)足够长，18～24bp，以保证特异性，当然，不是说越长越好，太长的primer同样会降低特异性，并且降低产量；
2)GC%，40%~60%；
3)5'端和中间序列要多GC，以增加稳定性；
4)避免3'端GCrich，个BASE不要有GC，或者5个有3个不要是GC。
5)避免3'端的互补，否则，容易造成DIMER；
6)避免3'端的错配；
7)避免内部形成二级结构；
8)附加序列(RT site，Promoter sequence)加到5'端，在算Tm值时不算，但在检测互补和二级结构要加上它们；
9)使用兼并primer时，要参考密码子使用表，注意：生物偏好性，不要在3'端使用兼并primer，并使用较高的primer浓度(1μM～3μM)；
10)学会使用一种design software，PP5，Oligo6，DNA star，Vector NTI，Online design et al。
实验注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括绝对定量和相对定量）和定性分析。主要服务：DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。