油菜内标准PEP基因探针法PCR试剂盒

保存条件 ：低温冷藏

保质期 ：详见说明书

英文名 ：详见说明书

库存 ：100

供应商 ：上海一研

规格 ：50T

油菜内标准PEP基因探针法PCR试剂盒产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强
样品RNA的抽提：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。 ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA质量检测
1）紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释（1:100）后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 ?g RNA/ml。样品RNA浓度(?g/ml)计算公式为：A260 ×稀释倍数× 40 ?g/ml。
样品cDNA合成:
①反应体系
序号  反应物  剂量 1  逆转录buffer  2μl
2  上游引物  0.2μl
3  下游引物  0.2μl
4 dNTP  0.1μl
5  逆转录酶MMLV  0.5μl
6  DEPC水  5μl
7  RNA模版  2μl
8  总体积  10μl
轻弹管底将溶液混合，6000rpm短暂离心。
②混合液在加入逆转录酶MMLV 之前先70℃干浴3分钟，取出后立即冰水浴至管内外温度一致，然后加逆转录酶0.5μl，37℃水浴60分钟。
③取出后立即95℃干浴3分钟，得到逆转录终溶液即为cDNA溶液，保存于-80℃待用。

48T/96T    Sus scrofa; Porcine (Pig)
过氧化还原酶1(PRDX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Peroxiredoxin 1 (PRDX1)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
端粒重复结合因子1(TERF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Telomeric Repeat Binding Factor 1 (TERF1)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
油菜内标准PEP基因探针法PCR试剂盒血小板衍生生长因子B(PDGFB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor Subunit B (PDGFB)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
核连蛋白1(NUCB1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Nucleobindin 1 (NUCB1)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
褪黑素受体1B(MTNR1B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Melatonin Receptor 1B (MTNR1B)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
松弛素/胰岛素样肽受体3(RXFP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 3 (RXFP3)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
RAR相关孤儿素受体γ(RORγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for RAR Related Orphan Receptor Gamma (RORg)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
溶质载体家族16成员3(SLC16A3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Solute Carrier Family 16, Member 3 (SLC16A3)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
溶质载体家族30成员1(SLC30A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 1 (SLC30A1)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
溶质载体家族30成员4(SLC30A4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Solute Carrier Family 30 Member 4 (SLC30A4)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
溶质载体家族30成员7(SLC30A7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Solute Carrier Family 30 Member 7 (SLC30A7)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
鞘氨醇1磷酸酯裂解酶1(SGPL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Sphingosine 1 Phosphate Lyase 1 (SGPL1)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
11-β-羟基类固醇脱氢酶2(HSD11β2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 2 (HSD11b2)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
L-型电压依赖钙离子通道α1S亚基(CACNα1S)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, L-Type, Alpha 1S Subunit (CACNa1S)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
L-型电压依赖钙离子通道α1C亚基(CACNα1C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, L-Type, Alpha 1C Subunit (CACNa1C)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。