biosharp BL523B 超敏ECL化学发光底物

规格 ：500ml

ECL化学发光底物（超敏）

产品简介：

 ECL超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原。 

用途：用于HRP标记抗体的Western Blot和HRP标记探针的核酸杂交。

产品特点：

1、灵敏度高：可检测低皮克级的蛋白；

2、信号持续时间长：光信号持续时间长达5小时；

3、稳定试剂：工作液在24小时内保持稳定；

4、成像方法：适用于X射线胶片、CCD或激光凝胶成像仪；

5、价格经济：针对稀释的抗体浓度条件进行了优化，节省抗体：

一抗：以1 µg/mL储存液稀释1:1,000至1:4,000倍

二抗：以1 µg/mL储存液稀释1:2,000至1:5,000倍

6、简单易用：可替代其它公司的ECL发光底物，操作步骤无需进行特别优化；

使用方法:

1、执行常规SDS-PAGE、转膜和Western Blot步骤。注意用HRP标记IgG或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹法。

2、 Western Blot最后一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液：分别取等体积的溶液A和B，放入干净容器中混合。建议立即使用工作液，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。

3、 用镊子取出膜，搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜完全干燥。将膜完全浸入发光工作液（0.125mL发光工作液/cm2膜）中，与发光工作液充分接触。室温孵育3分钟，准备立即压片曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度，有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促反应，使用过少的发光工作液不利反应进行，也会导致膜上条带曝光不均和明显降低灵敏度。为达节约目的可将膜剪小但勿降低发光液用量。

4、 用镊子夹起膜，搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。

5、 打开X光胶片暗盒，在暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将Western Blot膜贴在保鲜膜上，将保鲜膜折起来完全包裹Western Blot膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖Western Blot膜的保鲜膜固定在暗盒内，蛋白带面向上。

6、 暗房内压X光胶片，分别曝光不同的时间，如数秒到数分钟。显影冲洗。建议第一次曝光 60 秒，之后可调整曝光时间以达到最佳结果。化学发光反应在底物孵育后的前 5-30 min期间是最强烈的。这一反应可以持续几个小时，但强度会随时间下降，如有底物孵育后较长时间后曝光，曝光时间可能需要延长以获得较强信号。          

 

保存条件：

  室温运输，4 ℃密封避光保存一年，短期可放置室温。