NP-40裂解液  C1057  厂家直销,提供OEM定制服务,大包装更优惠

NP-40裂解液 C1057 厂家直销,提供OEM定制服务,大包装更优惠

价格: ¥200 - 680

品牌:普利莱 品牌认证

货号:C1057-100/500

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产品详情

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保存条件 :4度

保质期 :一年

英文名 ://

库存 :大量

供应商 :普利莱

CAS号 ://

规格 :100ml/500ml

NP-40裂解液 C1057
描述:
NP-40 裂解液是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40 裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 PAGEWestern、免疫沉淀(immunol precipitationIP)、免疫共沉淀(co-IP)ELISA 等。

本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品,也可以用于真菌或细菌样品。
NP-40 裂解液的主要成分为 Tris(pH7.4)NaCl1% NP-40EDTA 以及磷酸酶抑制剂。
NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用普利莱P1511 BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
储存:
4℃保存12 个月有效

制备细胞裂解产物
  1. 800g 4℃离心5分钟收集培养细胞,而后用预冷的PBS洗涤细胞两次。估计细胞离心后的体积(PCV, 106 cells=~20 ml, 107 cells =~100 ml PCV);
  2. 50100 ml PCV加入5倍体积裂解液250~500 ml,涡旋震荡10秒,冰浴放置20分钟;
  3. 12000g 4℃离心15分钟,将上清转移到新的离心管中,即得细胞总蛋白产物。
制备组织裂解产物
  1. 50-100 mg组织在冰上剪成碎片,用预冷的PBS洗涤2次离心弃去PBS
  2. 按照每20 毫克组织加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当
添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
  1. 4℃用玻璃匀浆器匀浆20-40次,直到95%的细胞被破碎,涡旋震荡10秒,冰浴放置20分钟;
  2. 12000g 4℃离心15分钟,将上清转移到新的离心管中,即得组织总蛋白产物,可用于后续的免疫沉淀或者Western Blot等实验。
注意: 
  1. 在转移上清液时不要吸入底部的沉淀物;
  2. 在做免疫沉淀或免疫共沉淀时最好在实验前进行蛋白的提取,以避免某些不稳定蛋白的降解;
  3. 在该裂解缓冲液中未加入蛋白酶抑制剂,用户可自行选择进行添加。









     

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