YJ101 Protein A琼脂糖磁珠

规格 ：1mL×2

Protein A琼脂糖磁珠
Protein A Magarose Beads
本产品4℃运输；保存于4℃，禁止产品冻结，长期存放请保证试剂管竖立向上，保质期24个月。

货号规格
goodYJ101     1 mL×2

产品简介
good琼脂糖磁珠(Magarose Beads)系列产品是医学与分子生物学研究中重要的载体工具，其粒径相对集中，表面布满丰富的羟基官能团，具有超顺磁性以及快速磁响应性等特点。
goodProtein A琼脂糖磁珠是由琼脂糖磁珠(Magarose Beads)与Protein A共价结合形成的复合微粒，其具有更高的抗体结合能力和较低的非特异蛋白吸附率，洗脱条件更均一，一步纯化即可从血清样品中分离出纯度大于90%的抗体。因其本身为微米级磁性微球，所以不需要离心操作，可大幅度缩短抗体吸附所需的时间。
good本产品适用于血浆、腹水以及组织培养上清液等样品中的抗体纯化，也可用于抗体固定及其它相关研究。

产品参数
 

项目	参数
平均粒径	30~100 µm
浓度	20%(V/V)
配基	Protein A
介质	磁性琼脂糖微球
抗体结合能力	＞10 mg Human IgG/mL Beads

自备试剂
 

缓冲液	推荐配方
结合/漂洗缓冲液	0.5 M NaCl, 20 mM Na2HPO4, pH 7.0
洗脱缓冲液	100 mM Gly, pH 3.0
中和缓冲液	1.0 M Tris-HCl, pH 8.5

操作步骤
good◆ 样本处理
good◆gg1. 上样之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值，可以用 结合/漂洗缓冲液 对血清、腹水或细胞培养液等样品进行稀释，或者也可以将样品用 结合/漂洗缓冲液 透析。样品在上样前建议离心或用0.22 μm或0.45 μm滤膜过滤，以减少杂质，提高蛋白纯化效率。

good◆ 磁珠预处理
good◆gg2. 将 Protein A琼脂糖磁珠 颠倒数次，使其充分混匀，取所需量的磁珠悬液，转移至离心管中，接着在磁力架上静置1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上后，吸弃上清；
good◆gg3. 加入1~2倍琼脂糖磁珠体积的 结合/漂洗缓冲液 ，用移液器反复吹打5次，接着在磁力架上静置1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上后，吸弃上清；
good◆gg4. 重复步骤3两次；

good◆ 抗体与磁珠结合
good◆gg5. 结合：将上述预处理好的磁珠与样品混合，置于翻转混合仪上孵育(常温30~60 min)，接着在磁力架上静置1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上，溶液变澄清后，把上清液转移到新的离心管中备用(上清液可用于检测抗体是否存在残留)，离心管中剩余的即为 抗体-磁珠复合物 ；
good◆gg6. 洗涤：在上一步得到的 抗体-磁珠复合物 中加入5倍琼脂糖磁珠体积的 结合/漂洗缓冲液 ，用移液器反复吹打5次，接着在磁力架上静置1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上，溶液变澄清后，吸弃上清。再重复此步骤两次；

good◆ 洗脱
good◆gg7. 向洗涤后的 抗体-磁珠复合物 中加入3~5倍琼脂糖磁珠体积的 洗脱缓冲液 ，用移液器反复吹打5次，置于翻转混合仪上孵育(常温5~10 min)，接着在磁力架上静置1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上，溶液变澄清后，吸取上清，收集洗脱组分，即为目标抗体；

good◆ 中和
good◆gg8. 向洗脱组分中加入1/10洗脱体积的 中和缓冲液 ，调节pH值至7.0~8.0；

good◆ 磁珠保存
good◆gg9. 使用后的琼脂糖磁珠用1~3倍磁珠体积的 洗脱缓冲液 重悬磁珠，接着在磁力架上静置1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上，溶液变澄清后，吸弃上清。重复两次；
good◆g10. 加入1~3倍琼脂糖磁珠体积的 结合/漂洗缓冲液 重悬磁珠，接着在磁力架上静置1 min，待磁珠吸附到离心管侧壁上，溶液变澄清后，吸弃上清；
good◆g11. 加入4~5倍琼脂糖磁珠体积的20%乙醇，置于2~8℃保存。

注意事项
good1. 琼脂糖磁珠使用前应充分混匀；
good2. 琼脂糖磁珠应保存在储存溶液中，防止干燥；
good3. 请勿将琼脂糖磁珠冷冻或离心，以免引起不可逆聚集；
good4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作；本产品仅限科研使用。