转基因品系玉米TC1507染料法qPCR试剂盒

转基因品系玉米TC1507染料法qPCR试剂盒

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转基因品系玉米TC1507染料法qPCR试剂盒原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
  PCR反应的特异性决定因素为:
  ①引物与模板DNA特异正确的结合;
  ②碱基配对原则;
  ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
  ④靶基因的特异性与保守性。

猴子孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒    phospho-GATA4 (Ser105)    磷酸化GATA结合蛋白4抗体
猴子诱导型合成酶(iNOS)免疫试剂盒    GATM    GATM蛋白抗体
猴子乙酰胆碱受体抗体(AChRab)免疫试剂盒    GARB1    γ1氨基丁酸受体GABAA Rβ1抗体
猴子循环免疫复合物(CIC)免疫试剂盒    GPATCH2    G蛋白修补结构域蛋白2抗体
猴子血小板因子4(PF-4/CXCL4)免疫试剂盒    GPX1    谷胱甘肽过氧化酶1
猴子血管内皮细胞生长因子受体-3(VEGFR-3/Flt-4)免疫试剂盒    GM-CSF    粒细胞-巨噬细胞克隆刺激因子抗体
猴子血管内皮细胞生长因子(VEGF)免疫试剂盒    GPR62    G蛋白偶联受体GPR62蛋白抗体
猴子性激素结合球蛋白(SHBG)免疫试剂盒    GREB1    乳腺癌雌激素调控蛋白GREB1抗体
猴子脱氢表雄酮(DHEA)免疫试剂盒    GDF9    生长分化因子9抗体
猴子天门冬氨酸氨基转移酶(AST)免疫试剂盒    GAPDH     3-磷酸甘油醛脱氢酶抗体
猴子瘦素(LEP)免疫试剂盒    GDF15    生长分化因子15/巨嗜细胞抑制因子1抗体
猴子肾上腺髓质素(ADM)免疫试剂盒    GPR91    G蛋白偶联受体GPR91蛋白抗体
猴子神经型合成酶(nNOS)免疫试剂盒    GLUT8    葡萄糖转运蛋白8抗体
猴子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫试剂盒    Glycophorin C    糖蛋白C抗体
猴子凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)免疫试剂盒    GABA Transporter 1    γ氨基丁酸运载蛋白1抗体
猴子脑钠素/脑钠尿肽(BNP)免疫试剂盒    GATA2    GATA结合蛋白2抗体
猴子内皮型合成酶(eNOS)免疫试剂盒    Growth Arrest Specific Protein 7    生长休止特定蛋白7抗体
猴子内皮素1(ET-1)免疫试剂盒    phospho-GluR1 (Ser836)    磷酸化谷氨酸受体1抗体
猴子内毒素(ET)免疫试剂盒    GPR116    G蛋白偶联受体116抗体
猴子免疫球蛋白G(IgG)免疫试剂盒    G protein alpha 12    鸟苷酸调节蛋白12抗体
猴子类风湿因子(RF)免疫试剂盒    phospho-GFAP (Ser8)    磷酸化胶质纤维酸性蛋白抗体
猴子巨噬细胞移动抑制因子(MIF)免疫试剂盒    phospho-GABBR2 (Ser783)    磷酸化G氨基丁酸B型受体2抗体
转基因品系玉米TC1507染料法qPCR试剂盒猴子巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)免疫试剂盒    phospho-GABBR2 (Ser892)     磷酸化G氨基丁酸B型受体2抗体
猴子巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫试剂盒    GDF10    生长分化因子10抗体(TGF-β超家族10)
猴子胶原酶I(Collagenase I)免疫试剂盒    GPCR LOC51210    G蛋白偶联受体LOC51210蛋白抗体
猴子甲状旁腺激素(PTH)免疫试剂盒    GIG34    细胞生长抑制蛋白34
猴子基质金属蛋白酶11(MMP11)免疫试剂盒    Growth Hormone    生长激素抗体
猴子过氧化氢酶(CAT)免疫试剂盒    GMPPA    GDP甘露糖焦磷酸化酶抗体
猴子谷胱甘肽还原酶(GR)免疫试剂盒    GPR171    G蛋白偶联受体171抗体
猴子谷胱甘肽S转移酶(GSTs)免疫试剂盒    GPM6B    神经细胞膜糖蛋白M6b
猴子睾酮(T)免疫试剂盒    GUK1    鸟苷酸激酶GMK抗体
猴子分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫试剂盒    Galactocerebroside    半乳糖脑苷脂酶抗体产品特点:
灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强
检测特异性与灵敏度:
高性能的UNICONTM Taq热启动酶及组分优化的反应体系保证高度的特异性扩增,提升了扩增效率,使得UNICONTM qPCR Master Mix具有极高的检测灵敏度。以人293T细胞cDNA为模板,在相同条件下扩增低拷贝hbcl6基因,与同类产品相比,UNICONTM qPCR Master Mix具有更好的扩增特异性、更高的扩增效率及更好的复孔重复性,检测灵敏度更高。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

PCR实验步骤:
  ①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
  ②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
  ③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。
此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
  ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
  ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
  ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,
获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定   先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。

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