转基因构建hsp70-CrylAb基因探针法qPCR试剂盒

保存条件 ：低温冷藏

保质期 ：详见说明书

英文名 ：详见说明书

库存 ：100

供应商 ：上海抚生

CAS号 ：详见说明书

规格 ：50次

转基因构建hsp70-CrylAb基因探针法qPCR试剂盒原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
特异性强
　　PCR反应的特异性决定因素为：
　　①引物与模板DNA特异正确的结合；
　　②碱基配对原则；
　　③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
  ④靶基因的特异性与保守性。

兔γ-谷氨酰转移酶1(GGT1)免疫试剂盒    CTH    胱硫醚γ裂解酶抗体
兔β内啡肽(β-EP)免疫试剂盒    CFTR    囊性纤维化跨膜转运调节因子抗体
兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)免疫试剂盒    CKIP-1    酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗体
兔S100-A5蛋白(S100A5)免疫试剂盒    CD40L    CD40L抗体
兔P物质受体(SP-R)免疫试剂盒    Alpha s1 Casein    α-s1酪蛋白抗体
兔p物质(SP)免疫试剂盒    CIDEB    CIDEB抗体
兔p53(p53)免疫试剂盒    Scavenging Receptor SR-BI    高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗体
兔N端前脑钠素(NT-proBNP)免疫试剂盒    COPS7A    信号转导蛋白亚基7A抗体
兔NADPH氧化酶1(NOX1)免疫试剂盒    Survivin    细胞凋亡抑制因子抗体
兔C肽(C-Peptide)免疫试剂盒    Clostridium perfringens type D    D型产气荚膜梭菌抗体
转基因构建hsp70-CrylAb基因探针法qPCR试剂盒兔CD8分子(CD8)免疫试剂盒    Calcitonin    降钙素抗体
兔CD4分子(CD4)免疫试剂盒    C20orf14    20号染色体开放阅读框14抗体
兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)免疫试剂盒    CTGF    结缔组织生长因子抗体
兔ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1型13(ADAMTS13)免疫试剂盒    CTLA4    细胞毒性T细胞抗原-4抗体
兔8-异构前列腺素(8-epi-PGF2α)免疫试剂盒    Calcitonin receptor    降钙素受体抗体
兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)免疫试剂盒    C1orf38    1号染色体开放阅读框38抗体
兔1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)免疫试剂盒    CXorf36    脱羧酶蛋白体36抗体
山羊ELISA试剂盒    Connexin-40    间隙连接蛋白40抗体
山羊转化生长因子β2(TGF-β2)免疫试剂盒    Connexin 43    间隙连接蛋白43抗体
山羊转化生长因子β1(TGF-β1)免疫试剂盒    Connexin-45    间隙连接蛋白45抗体
山羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫试剂盒    CXCR1    细胞表面趋化因子受体1抗体
山羊脂联素(ADP)免疫试剂盒    CYP450    细胞色素P450单氧化酶抗体
山羊脂多糖/内毒素(LPS)免疫试剂盒    Cytochrome C    细胞色素C抗体
山羊脂蛋白脂酶(LPL)免疫试剂盒    CK1    细胞角蛋白1抗体
产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强
检测特异性与灵敏度:
高性能的UNICONTM Taq热启动酶及组分优化的反应体系保证高度的特异性扩增，提升了扩增效率，使得UNICONTM qPCR Master Mix具有极高的检测灵敏度。以人293T细胞cDNA为模板，在相同条件下扩增低拷贝hbcl6基因，与同类产品相比，UNICONTM qPCR Master Mix具有更好的扩增特异性、更高的扩增效率及更好的复孔重复性，检测灵敏度更高。
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

PCR实验步骤：
　　①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
　　②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
　　③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。
此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
　　④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
　　⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
　　⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，
获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定 　　先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。