转基因构建FMV启动子-PLRY基因探针法qPCR试剂盒

转基因构建FMV启动子-PLRY基因探针法qPCR试剂盒

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货号:FS-P99342

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供应商 :上海抚生

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规格 :50次

转基因构建FMV启动子-PLRY基因探针法qPCR试剂盒产品规格:50T
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产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年

人乙型肝炎病毒核心抗体IgM(HBcAb-IgM)免疫试剂盒    Phospho-CDK9 (Thr29)    磷酸化周期素依赖性激酶9抗体
人乙型肝炎病毒核心抗体IgG(HBcAb-IgG)免疫试剂盒    phospho-CHEK1 (Ser280)    磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体
人乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)免疫试剂盒    phospho-CHEK1(Ser317)    磷酸化细胞周期检测点激酶1抗体
人乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)免疫试剂盒    phospho-CDKN2A (Ser140)    磷酸化抑癌基因p16抗体
人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)免疫试剂盒    phospho-CDKN2A (Ser152)    磷酸化抑癌基因p16抗体
人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)免疫试剂盒    phospho-CDKN2A (Ser8)    磷酸化抑癌基因p16抗体
人乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)免疫试剂盒    phospho-CREB-1(Ser129)    磷酸化CREB-1抗体
人乙型肝炎病毒e抗体(HBeAb)免疫试剂盒    phospho-CSF2RB (Tyr766)    磷酸化粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体β抗体
人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)免疫试剂盒    phospho-CDH2 (Tyr820)    磷酸化N-钙粘附分子抗体
人乙酰肝素酶(HPA)免疫试剂盒    phospho-CDC27 (Thr244)    磷酸化后期促进复合蛋白3抗体
人乙酰辅酶A羧化酶合成酶(ACC)免疫试剂盒    phospho-c-Abl(Tyr283)    磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
人乙酰胆碱酯酶(AChE)抗体(IgG)免疫试剂盒    phospho-c-Abl(Thr735)    磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
人乙酰胆碱酯酶(AChE)免疫试剂盒    C9orf75    9号染色体开放阅读框75抗体
人乙酰胆碱受体抗体(AChRab)免疫试剂盒    CD4    CD4抗体
人乙酰胆碱(ACH)免疫试剂盒    CD42b    血小板糖蛋白GPIb抗体
人乙醛脱氢酶18家族成员A1(ALDH18A1)免疫试剂盒    CARM1    蛋白精氨酸N甲基4抗体
转基因构建FMV启动子-PLRY基因探针法qPCR试剂盒人乙醛脱氢酶(ALDH)免疫试剂盒    phospho-CARM1(Ser228)    磷酸化蛋白精氨酸N甲基4抗体
人乙基丙二酸免疫试剂盒    phospho-CDK6 (Tyr13)    磷酸化周期素依赖性激酶6抗体
人乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)免疫试剂盒    phospho-CBL2 (Tyr700)    磷酸化原癌基因CBL2抗体
人乙醇脱氢酶(ADH)免疫试剂盒    Cdc7    细胞分裂周期蛋白7抗体
人乙胺碘呋酮(AD)免疫试剂盒    Phospho-cdc25A (Ser124)    磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体
人胰脂肪酶(PL)免疫试剂盒    Cdc25B    细胞分裂周期蛋白25B抗体
人胰抑制素(Pancreastatin)免疫试剂盒    phospho-CD244(Tyr271)    磷酸化CD244抗体
人胰腺癌标志物CA242 免疫试剂盒    CACNG3    神经元电压门控钙通道γ3/L-type Ca++CP γ3抗体
人胰高血糖素样肽2受体(GLP2R)免疫试剂盒    C3orf25    3号染色体开放阅读框25抗体
人胰高血糖素样肽2(GLP2)免疫试剂盒    c-Myb    转录激活因子MYB抗体
人胰高血糖素样肽1受体(GLP1R)免疫试剂盒    CATSPER    阳离子通道精子相关蛋白1抗体
人胰高血糖素样肽1(GLP-1)免疫试剂盒    C1orf222    

特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
储存条件:-20℃以下,有效期12个月。
使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(最好用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。zui好设立一个专用的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。

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