转基因元件tOCS探针法荧光定量PCR试剂盒

保存条件 ：低温冷藏

保质期 ：详见说明书

英文名 ：详见说明书

库存 ：100

供应商 ：上海抚生

CAS号 ：详见说明书

规格 ：50次

转基因元件tOCS探针法荧光定量PCR试剂盒产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

特点：
1. 即开即用，用户只需要提供病毒样品。
2. 根据鲍疱疹样病毒保守序列设计的专一性引物，与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测，避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
储存条件：-20℃以下，有效期12个月。
人干扰素诱导跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)免疫试剂盒    Collagen V    Ⅴ型胶原抗体
人干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫试剂盒    Collagen X    Ⅹ型胶原抗体
人干扰素诱导T细胞趋化因子(ITAC/CXCL11)免疫试剂盒    Cyclin F    周期素F抗体
人干扰素活化基因205(Ifi205)免疫试剂盒    Cullin 7    泛素连接酶CUL7蛋白抗体
人干扰素调节因子8(IRF8)免疫试剂盒    COPS2    甲状腺受体相互作用蛋白15抗体
人干扰素调节因子3(IRF3)免疫试剂盒    COPS6    信号转导蛋白亚基6抗体
人干扰素a-抗体(Anti-IFN-ab)免疫试剂盒    COPS4    信号转导蛋白亚基4抗体
人钙转运ATP酶2C型成员1(ATP2C1)免疫试剂盒    cardiac Troponin I    心肌肌钙蛋白抗体
人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)免疫试剂盒    CAP1    CAP1抗体
人钙依赖性胞浆型磷脂酶A2(iPLA2)免疫试剂盒    CSF3    粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子3抗体
人钙卫蛋白免疫试剂盒    CCR7    细胞表面趋化因子受体7抗体
人钙网蛋白(CRT)免疫试剂盒    COX10    细胞色素c氧化酶10抗体
人钙联蛋白(calnexin)免疫试剂盒    CRTAM    CRTAM抗体
人钙离子通道抗体(IgG)免疫试剂盒    MCP4    单核细胞趋化蛋白4抗体
人钙结合蛋白S100A14 免疫试剂盒    KIR2DL3    NK细胞抑制性受体2DL3抗体
人钙结合蛋白S100A13 免疫试剂盒    CRX1    CRX抗体
人钙结合蛋白(CR)免疫试剂盒    CD8    CD8抗体
人钙激活中性蛋白酶6(CAPN6)免疫试剂盒    phospho-CBL2 (Tyr731)    磷酸化原癌蛋白CBL2抗体
人钙激活中性蛋白酶1(CAPN1)免疫试剂盒    phospho-CBL2 (Tyr774)    磷酸化原癌蛋白CBL2抗体
人钙调素特异抗体(CAM-ab)免疫试剂盒    Phospho-cdc2 (Thr14)    磷酸化周期素依赖激酶2抗体
人钙调磷酸酶(CaN)免疫试剂盒    Phospho-cdc2 (Tyr15)    磷酸化周期素依赖激酶2抗体
转基因元件tOCS探针法荧光定量PCR试剂盒人钙调结合蛋白(CALD)免疫试剂盒    Cdc25A    细胞分裂周期蛋白25抗体
人钙蛋白酶抑制蛋白(CAST)免疫试剂盒    Phospho-cdc25A (Thr506)    磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体
人钙蛋白酶抑素抗体(ACAST-DⅣ)免疫试剂盒    Phospho-cdc25A (Ser76)    磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体
人钙蛋白酶2(M/II)大亚基(CAPN2)(CAPN2)免疫试剂盒    Phospho-cdc25A (Ser178)    磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体
人钙/钙调素依赖性蛋白激酶2(CAMK 2)免疫试剂盒    caspase-8 subunit p18    半胱氨酸蛋白酶8抗体
人富组蛋白(histatin-5)免疫试剂盒    caspase-9 p10    半胱胺酸蛋白酶蛋白9-p10抗体
人富组氨酸糖蛋白(HRG)免疫试剂盒    CLEC5A    C型凝集素结构域家族5成员A抗体
人富亮氨酸α2糖蛋白1(LRG1)免疫试剂盒    CDK1    
使用方法：
一、样品采集：
1、食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品：用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL，注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管，立即混匀。
3、粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）
1. 注意：由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液（最好用带芯枪头，下同）。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。zui好设立一个专用的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。