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文献和实验
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库存 :100
供应商 :上海谷研
检测限 :25ng/mL800ng/mL
检测方法 :ELISA
应用 :1
适应物种 :详见说明书
标记物 :详见说明书
样本 :Total protease
规格 :48T/96T
植物总蛋白酶ELISA检测试剂盒使用说明书仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
样本处理及要求:
1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
肿瘤坏死因子受体超家族成员5(TNFRSF5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 5 (TNFRSF5) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
转录激活因子6(ATF6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Activating Transcription Factor 6 (ATF6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
Thy1细胞表面抗原(Thy1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Thy1 Cell Surface Antigen (Thy1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
粒细胞集落刺激因子受体(GCSFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Colony Stimulating Factor Receptor, Granulocyte (GCSFR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
白介素17受体A(IL17RA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 17 Receptor A (IL17RA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
CD163分子(CD163)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation (CD163) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
Salusinβ蛋白(Salusinβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Salusin Beta 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
Ⅱ类主要组织相容性复合体DQβ1(MHCDQβ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Major Histocompatibility Complex Class II DQ Beta 1 (MHCDQb1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
非受体型蛋白酪氨酸磷酸酶1(PTPN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase, Non Receptor Type 1 (PTPN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
拓扑异构酶Ⅰ(TOP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Topoisomerase I (TOP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
成纤维细胞生长因子21(FGF21)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 21 (FGF21) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
酶2(PON2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Paraoxonase 2 (PON2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
核连蛋白1(NUCB1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleobindin 1 (NUCB1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
核连蛋白2(NUCB2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nucleobindin 2 (NUCB2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
嘌呤霉素敏感性氨肽酶(PSA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Puromycin Sensitive Aminopeptidase (PSA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
WAP四二硫化物核心域蛋白5(WFDC5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for WAP Four Disulfide Core Domain Protein 5 (WFDC5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
真核翻译起始因子2α激酶3(EIF2αK3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Eukaryotic Translation Initiation Factor 2 Alpha Kinase 3 (EIF2aK3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Carnitine Palmitoyltransferase 1A, Liver (CPT1A) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
植物总蛋白酶ELISA检测试剂盒氧固醇结合蛋白样蛋白8(OSBPL8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Oxysterol Binding Protein Like Protein 8 (OSBPL8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
核苷酸还原酶M1(RRM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ribonucleotide Reductase M1 (RRM1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
衔接因子相关蛋白复合体2μ1(AP2μ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adaptor Related Protein Complex 2 Mu 1 (AP2m1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
5-甲基四氢叶酸高半胱氨酸甲基转移酶(MTR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for 5-Methyltetrahydrofolate Homocysteine Methyltransferase (MTR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
α-生育酚转运蛋白(TTPα)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha Tocopherol Transfer Protein (TTPa) 48T/96T Mus muscul需要而未提供的试剂和器材:
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
4.蒸馏水或去离子水
注意事项:
1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
试剂准备:
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
操作步骤:
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
实验结果计算:
以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。
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