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文献和实验
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保存条件 :低温冷藏
保质期 :详见说明书
英文名 :RT-LAMP kit for highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus American variant
库存 :100
供应商 :上海邦景
规格 :50次
高致病猪生殖与呼吸综合症病毒美洲型变异株RT-LAMP试剂盒储存条件及有效期:-20℃±5℃避光保存,有效期 12 个月。产品运输:标本运送应采用 2-8℃冰袋运输,严禁反复冻融。
质控标准:
阴性质控品:无明显扩增曲线或无 Ct 值显示;
阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32;
【结果分析条件设定】
u 基线(Baseline)设定:应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域(所有样本荧光信号无较大波动),起始点(Start)应避开荧光采集起始阶段的信号波动,终止点(End)应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环,建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定:将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性,无指数扩增期,Ct=40或无Ct;
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性,有明显的指数扩增期,Ct值应小于等于35;
3. 以上要求需在一次实验中同时满足,否则该次实验视为无效。
验法) ELISA Kit for Collagen Type IV Alpha 1 (COL4a1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
Ⅳ型胶原α1(COL4α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type IV Alpha 1 (COL4a1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
血管内皮生长因子B(VEGFB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor B (VEGFB) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
血管内皮生长因子C(VEGFC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor C (VEGFC) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
血管内皮生长因子D(VEGFD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor D (VEGFD) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
白介素15(IL15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 15 (IL15) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
血管生长素(ANG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiogenin (ANG) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
甲胎蛋白(αFP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
甲胎蛋白(αFP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
甲胎蛋白(αFP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
脂联素受体1(ADIPOR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
脂联素受体1(ADIPOR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
脂联素受体1(ADIPOR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
脂联素受体1(ADIPOR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
脂联素受体1(ADIPOR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
甲胎蛋白(αFP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 48T/96T Chicken (Gallus)
甲胎蛋白(αFP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
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激肽释放酶3(KLK3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Kallikrein 3 (KLK3) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
血管生长素(ANG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Angiogenin (ANG) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
嗅素4(OLFM4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Olfactomedin 4 (OLFM4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
鳞状细胞癌抗原2(SCCA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Squamous Cell Carcinoma Antigen 2 (SCCA2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)【结果判断】
1. 阳性:有明显的指数扩增期,且Ct<38; 2.可疑:有明显的指数扩增期,且38≤Ct<40,此时样本为可疑样本;对于可疑样本建议复核一次,若复核结果Ct<40且有指数扩增期,则判定为阳性,否则判定为阴性;
3. 阴性:无指数扩增期,Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果;
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,可能会导致出现假阴性结果。
高致病猪生殖与呼吸综合症病毒美洲型变异株RT-LAMP试剂盒反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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