小鼠皮下结缔组织细胞L Wnt 3A

细胞形态 ：成纤维细胞

运输方式 ：常温/干冰冻存管

生长状态 ：贴壁生长

规格 ：T25

L-M(TK-) cells (ATCC CCL-1.3) 用Wnt-3A表达载体转染并在含G418的培养基中筛选稳转株。Wnt-3A基因编码一个有变异的信号功效分泌性糖蛋白。 Wnt基因控制胚胎发过程中的许多模式形成和生长事件。这些细胞分泌有生物活性的Wnt-3A蛋白。 它们是目前生产Wnt-3A条件培养基的最好来源。由于这种条件培养基还包含Wnt-3A蛋白外的其他因子，对于涉及Wnt-3A条件培养基的实验有必要用其来源细胞株(ATCC CRL-2648)作对照。
培养条件：DMEM（高糖）+10%FBS。
传代方法：1:4~1:10传代；2~3天换液1次。


发货方式
我们采取两种形式的细胞发货方式:
1.复苏发货
a. T25瓶活细胞发货
b.血清重悬发货
2.冻存管发货(干冰发货)
对于采取冻存管方式发货的客户，为了保证可靠性我们会多发一管细胞(共2管), 干冰覆盖保温运输。
复苏及冻存发货方式均为顺丰速运，我们会根据收货地址及温度差异采取不同的发货方式，并在发货前的
3天内与您确认收货地址及配送方式。
欢迎江浙沪地区的客户到实验室上门自取。


贴壁细胞传代方式参考:
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，然后置于无菌操作台，打
开瓶口，将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例并置于细胞培养箱中培
养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，-般2到3天换一次液;
2.待细胞长满瓶底面积809%-90%，需要对其进行传代,传代比例为1:3到1:6;
3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5
mIPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 m预热好的胰酶，置于37°孵育消化(第- -次消化需时常取出置于
显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间,记录最佳消化时
间，以便于下次消化) ,消化好后加入3m完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之
完全脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min, 弃.上清,加入完全培养基重悬细胞，进行传代。

悬浮细胞传代方式参考:
1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，然后置于无菌操作台，打开瓶口，将旧培
养基更换成5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行
换液或传代，每2至3天加入新鲜培养基(根据细胞密度) ;
2.通过添加新鲜培养基来维持培养。或者可以通过离心去除旧培养基，再加入新培养基并以5*105个活细胞/mL的密度再悬
浮进行培养。建议将细胞密度维持在5*105个至1x106个细胞/mL之间。
具体操作方式请参阅细胞说明书。