人白细胞介素17αELISA检测试剂盒说明书

供应商 ：上海西格

库存 ：46

样本 ：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等

标记物 ：详见说明书

适应物种 ：大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物

应用 ：ELISA检测

检测方法 ：详见说明书

检测限 ：用于检测血浆，血清及相关液体等样本

规格 ：48T/96T

产品名称：人白细胞介素17αELISA检测试剂盒说明书
英文名称：Interleukin 17α
检测范围：1pg/mL~32pg/mL
灵敏度：0.1
规格：96T/48T 
保存；2-8℃。
检测目的：用于检测血浆，血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属：大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。
 

 
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。
备试剂与收集血样：
1.  收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。
2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）
检测程序：
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗处反应15 分钟。
8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
性能：
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月
 

 
使用方法：
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
 12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
 6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
 3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
 1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
CM-H019人前列腺上皮细胞完全培养基100mLN6-苯甲基-5’-乙基甲酰胺基腺苷质量规格：美国进口N6-Benzyl-5'-ethylcarboxamido Adenosine
A-375 [A375], 人恶性素瘤细胞株P1,P5-Di（腺苷-5'-)五1酸盐，五钠盐质量规格：美国进口P1,P5-Di(adenosine-5') pentaphosphate penta salt
人横纹肌肉瘤细胞;A-204 大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基 100mLP1,P5-Di(腺苷-5'-)五1酸盐，五铵盐e pentaammonium salt质量规格：美国进口P1,P5-Di(adenosine-5') pentaphosphate pentaammonium salt
主动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)N6-苯甲基腺苷质量规格：美国进口N6-Benzyl Adenosine
ENPEP Others Human 人 ENPEP / Aminopeptidase A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 酰基孟鲁司特-b-D-葡萄糖苷酸质量规格：美国进口Montelukast acyl-b-D-glucuronide
HUVEC(HUV-EC-C) (人脐静脉血管内皮细胞) 5×106cells/瓶×2 SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌细胞 人癌细胞;MDA-MB-435S碱性嶙酸酶测试盒shēng huà shì jì容量：500支/包
人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38]O-乙酰-L-丝酸盐... O-Acetyl-L-serine hydrochloride 66638-22-0 100MG 通用试剂
NAMPT Others Human 人 PBEF / Visfatin / NAMPT 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 肌醇;环六烷醇 Inositol;Mqso-Inositol;Cyclohqxitol;Mqct sugcr;Cyclohqxcnqhqxol;Hqxcxy7noxycyclohqxcnq;Mqsoinositq;PhcsqoMcnnitq 87-89-8
CM-H005人肺大静脉平滑肌细胞完全培养基100mLDL-精酸shēng huà shì jì容量：RT10克
Raji细胞，Butt's 瘤细胞 卵巢癌细胞,L1细胞 EB病毒转化的人B细胞;KM98037291-22-7氘代-D5PYRIDINE-D5
人支气管上皮样细胞;BEAS-2BTRISGLYCINE-SDS5XTG-SDS缓冲液,5X 浓缩液超级500MLRT
HA Others H1N2 甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-脱氧-D-核糖 2-Dqoxy-D-ribosq 233-67-2
CL-0330COLO 320DM(人结直肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2HCTFVISUALIZATION500/CS可视固定系统, 含酒精组织学级3MLRT
CLK3 Others Human 人 CLK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) SuperScriptⅡ阴性逆转录酶25克RT
人外根壳细胞总RNAHHORSC NA591-49-11-甲基-1-环，工业75%1-metxYL-1-CYCLOHEXENE
人白细胞介素17αELISA检测试剂盒说明书IL13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL-13 / Ierleukin-13 人细胞裂解液 (阳性对照) 黄柏酮（标准品）Obacunone 质量规格：HPLC≥98%，标准品
BABL/3T3 BABL/C小鼠胚胎成纤维细胞黄豆黄苷（标准品）Glycitin质量规格：HPLC≥98%，标准品
CL-0182P815(小鼠肥大细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2黄豆黄素（标准品）Glycitein质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)黄独素B(标准品)Diosbulbin B质量规格：HPLC≥98%，标准品
人整合SV40基因的上皮细胞;HBL-100 [HBL100] 人肾动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL黄连碱（标准品）Coptisine质量规格：HPLC≥98%，标准品
操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。产品仅用于科研