小鼠葡萄糖氧化酶ELISA试剂盒

库存 ：100

供应商 ：上海一研

检测限 ：0.625ng/mL20ng/mL

检测方法 ：ELISA Kit

应用 ：0.1

适应物种 ：详见说明书

标记物 ：详见说明书

样本 ：Glucose Oxidase

规格 ：48T/96T

小鼠葡萄糖氧化酶ELISA检测试剂盒说明书实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人1-磷酸鞘氨醇（S1P）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人1-磷酸鞘氨醇（S1P）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样本处理及要求:
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。 需要而未提供的试剂和器材: 1.酶标仪（450nm） 2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 4.蒸馏水或去离子水

注意事项:
1.严格按照规定的时间和被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作中有一定的技术要求，在检测过程中除正常反应外，有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：
①标本因素；
②试剂因素；
③操作因素。

Mst2    蛋白激酶MST2抗体
MSY2    DNA结合蛋白C抗体
MUC5AC    胃粘液素抗体
MSH gamma    促黑细胞激素γ抗体
Methamphetamine    甲基抗体
MIC1    结肠癌相关蛋白MIC1抗体
MHC Class II    组织相容性复合体β抗体
l-Myc    Myc基因肺癌相关蛋白抗体
Megalin    糖蛋白gp330抗体
phospho-MyoD1    磷酸化肌原调节蛋白抗体
MAP4K1    造血祖细胞激酶1抗体
MAP4K4    丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体
phospho-MAP3K7IP1    磷酸化转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体
phospho-MAP3K7IP1    磷酸化转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体
phospho-MAPK3    磷酸化丝裂原活化蛋白激酶3抗体
phospho-MEK2    磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体
phospho-MEF2D    磷酸化肌细胞特异性增强因子2D抗体
phospho-MEF2D    磷酸化肌细胞特异性增强因子2D抗体
Phospho-MAPKAPK2    磷酸化丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体
phospho-MAPKAPK5    磷酸化p38调节/激活蛋白激酶抗体
phospho-MAPKAPK5    磷酸化p38调节/激活蛋白激酶抗体
phospho-MAP4K1    磷酸化造血祖细胞激酶抗体
PRAK    p38调节/激活蛋白激酶抗体
MEF2D    肌细胞特异性增强因子2D抗体
phospho-MAP4K4    磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体
Phospho-MARCKS    磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体
MTGR1    髓易位基因相关蛋白1抗体
BBS6    巴德-毕德氏综合征蛋白BBS6抗体
MKLP2    有丝分裂驱动蛋白样2抗体
MFAP1    微原纤维胶原相关蛋白1抗体
MND1    减数分裂核分裂蛋白1抗体
MDFIC    肌原调节抑制蛋白抗体
MDM2BP    双微体2癌基因结合蛋白抗体
MMP20    基质金属蛋白酶20
MRP8    多药耐药相关蛋白8抗体
MRP7    多药耐药相关蛋白7抗体
phospho-MLF1 Interacting Protein    磷酸化卡波西氏肉瘤疱疹病毒潜伏核抗原抗体相互作用蛋白1抗体
小鼠葡萄糖氧化酶ELISA检测试剂盒说明书MATK    酪氨酸蛋白激酶细胞分裂素抗体
MLF1 Interacting Protein    卡波西氏肉瘤疱疹病毒潜伏核抗原抗体相互作用蛋白1抗体
MAGEF1    黑色素瘤抗原抗体F蛋白家族1抗体
MGAT5    糖蛋白GNTVA抗体
MIIP    IGFBP2结合蛋白/迁移和侵润抑制蛋白抗体
MAP1B    微管相关蛋白1B抗体
MSH3    错配修复蛋白3抗体
MDGA2    神经元膜糖蛋白锚定蛋白2抗体
MYRIP    MYRIP蛋白抗体
Myelin PLP    髓磷酯髓鞘蛋白1抗体
MCSF    巨噬细胞克隆刺激因子抗体
4-Mar    膜相关环指蛋白4抗体
MLCK    肌球蛋白轻链激酶抗体
MPS1    单极纺锤体蛋白激酶1抗体
Mad2L2    有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白2抗体
Monoamine Oxidase B    单胺氧化酶B抗体
MCM4    微小染色体维持缺陷蛋白4抗体
MAP1LC3A    自噬微管相关蛋白轻链3抗体
MRF/C11orf9    髓鞘基因调控因子抗体
MYBPC1    肌球蛋白结合蛋白C抗体
Phospho-MKP1     磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1抗体
Metabotropic glutamate receptor 2    促代谢型谷氨酸受体2抗体
MGLUR3    代谢型谷氨酸受体-3抗体
CXCL2    巨噬细胞炎症蛋白2抗体
Metallothionein    金属硫蛋白抗体
Phospho-MAP2    磷酸化微管相关蛋白2抗体
MMRN1    内皮细胞MMRN1蛋白抗体
Phospho-MEK1/2     磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗体
Phospho-Met      磷酸化肝细胞生长因子受体抗体
Phospho-Met     磷酸化肝细胞生长因子受体抗体
Phospho-Mcl1     磷酸化髓样细胞白血病-1抗体
Phospho-MDM2     磷酸化双微体2癌基因抗体
Phospho-MEF2A     磷酸化肌细胞增强因子2抗体
Phospho-MEF2A     磷酸化肌细胞增强因子2抗体
phospho-MEK1     磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体
Phospho-MAP2     磷酸化微管相关蛋白2抗体
MAPKAP Kinase 2    丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体
Phospho-MAPKAPK2     磷酸化丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体
Phospho-MAPKAPK2    磷酸化丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体
Phospho-MARCKS     磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体
Phospho-MARCKS     磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体
Met     肝细胞生长因子受体抗体
phospho-MAP3K9+MAP3K10    磷酸化丝裂原活化蛋白
特点:
1、适用于血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
2、可检测动物类型丰富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、兔、猪、犬、牛、绵羊、鸡、虾、鱼等。
3、可检测指标齐全：白介素，干扰素，肺炎衣原体，血管紧张素，炎症因子、血管生成素、动脉粥样硬化因子、趋化因子、生长因子基质金属蛋白酶、脂肪因子等等指标。
自备材料:
1）蒸馏水。
2）加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3）振荡器及磁力搅拌器等。
安全性:
1）避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2）实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3）不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

操作步骤
1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。 2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。
进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。
4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。
5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6.在储存和温育时避免强光直接照射。
7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
9.不能使用过期产品。
10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。