小鼠肿瘤坏死因子γ检测试剂盒

库存 ：100

供应商 ：上海莼试

检测限 ：2.5pg/mL80pg/mL

检测方法 ：ELISA

应用 ：0.1

适应物种 ：详见说明书

标记物 ：详见说明书

样本 ：Tumor necrosis factor γ

小鼠肿瘤坏死因子γ检测试剂盒检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被检测试剂盒抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的2检测试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

2,4-D    2，4-二氯苯氧乙酸(除草剂)抗体
5-HTR1A    5-羟色胺受体1A抗体
5-HT/5 Hydroxy Tryptophan    5羟色胺抗体
5-HTR1B    5-羟色胺受体1B抗体
Synapsin II    神经突触素2抗体
RNF142    环指蛋白142抗体
SYT3    突触结合蛋白3抗体
SNAP25    突触相关蛋白25抗体
SOCS1    细胞因子信号传导抑制蛋白1抗体
SOD1    超氧化物歧化酶1抗体(铜/锌过氧化物歧化酶SOD)
SOD2    超氧化物歧化酶2抗体
Somatostatin 28    生长抑素抗体
SOX2    胚胎干细胞关键蛋白抗体
SSTR4    生长抑素受体4抗体
Smad4    Smad4抗体
Smad7 + Smad6    Smad7抗体
Shh    Shh信号转导通路膜蛋白受体抗体
STEAP1    前列腺跨膜上皮1抗原抗体
SLC39A6    雌激素调节蛋白LIV1/锌转运蛋白抗体
Securin    垂体肿瘤转化基因抗体
Shiga-Like Toxin Type II Variant    猪水肿素(O139)菌体蛋白抗体
SAMDC    S-腺苷蛋氨酸脱羧酶抗体
5-HTR2B    5-羟色胺受体2B抗体
Stra8    视黄酸激活基因8抗体
SMMHC    平滑肌肌球蛋白重链抗体
SCUBE1    新型血小板相关血管内皮分泌蛋白SCUBE1抗体
Staufen     双链RNA结合蛋白Staufen抗体
Synaptotagmin XII    突触结合蛋白12抗体
小鼠肿瘤坏死因子γ检测试剂盒Shiga-like toxin IIe variant subunit A    大肠杆菌志贺样毒素Ⅱ型突变体（O139菌型）抗体
SIAH1    泛素连接酶Siah1抗体
Phospho-Smad1 (Ser206)    磷酸化细胞信号转导分子Smad-1抗体
Phospho-5-Lipoxygenase(Ser271)    磷酸化5-脂氧合酶抗体
Phospho-5-Lipoxygenase(Ser663)    磷酸化5-脂氧合酶抗体
SISP1    应激诱导分泌蛋白1抗体
ANUP    抗肿瘤蛋白ANUP抗体
SGTA    小谷氨酰胺三角四肽重复区蛋白α抗体
SUGT1    SUGT1蛋白抗体
SKA3    纺锤体和着丝粒相关蛋白3抗体
SKA2    纺锤体和着丝粒相关蛋白2抗体
SIM1    转录因子蛋白SIM1抗体
SOX14    核转录因子SOX14抗体
STAT1 p84+p91    信号转导与转录激活因子1抗体
SOX6    核转录因子SOX6抗体
SOX8    核转录因子SOX8抗体
STAC    STAC1蛋白抗体
Spindly    亚砷盐相关蛋白抗体
STAU2    双链RNA结合蛋白Staufen2抗体
Slc22a5    溶质载体家族蛋白22成员5抗体
SNX27    SNX27蛋样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：检测范围1-50ng/mL，检测浓度小于1.0 ng/mL。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月

操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白；预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。