小鼠乙酰胆碱转移酶检测试剂盒

库存 ：100

供应商 ：上海莼试

检测限 ：10pmol/L320pmol/L

检测方法 ：ELISA

应用 ：1

适应物种 ：详见说明书

标记物 ：详见说明书

样本 ：Choline acetyltransferase

小鼠乙酰胆碱转移酶检测试剂盒检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被检测试剂盒抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的2检测试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

Neutrophil Elastase    中性粒细胞弹性蛋白酶ELANE抗体
Hepatitis C Virus RNA-directed RNA polymerase    丙型肝炎病毒NS4B（65kDa）抗体
NGFRAP1    神经生长因子受体相关蛋白1抗体
NRH2    死亡结构域蛋白NRH2抗体
Neuronal thread protein AD7c-NTP    神经丝蛋白抗体
phospho-NFKB p65(Ser536)    磷酸化细胞核因子抗体
Notch1    跨膜受体蛋白Notch-1抗体
Phospho-NR1D1(Ser55 + Ser59)    磷酸化细胞核受体Rev-Erbα抗体
Newcastle disease virus    鸡新城疫病毒抗体
NADPH    还原型辅酶Ⅱ/磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸抗体
NIT2    NIT2蛋白抗体
小鼠乙酰胆碱转移酶检测试剂盒NeuroD1    神经细胞分化因子1抗体
NFAT2    活化T细胞核因子1蛋白抗体
NMDAR1    谷氨酸受体1抗体
NRSF/REST    神经元抑制蛋白抗体
ARHGAP17    神经细胞发育相关调控蛋白抗体
IKB alpha    核因子κB抑制蛋白α抗体(IκB-α)
Phospho-NFKB p65(Ser276)    磷酸化细胞核因子NF-κB p65抗体
Phospho-NFKB1(Ser932)    磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体
Phospho-eNOS (Ser1177)    磷酸化合成酶3（内皮型）抗体
NUCKS1    核酪蛋白激酶和细胞周期蛋白依赖性激酶底物1抗体
NIFK    NIFK蛋白抗体
phospho-NIFK (Thr234)    磷酸化NIFK抗体
NFX1    核转录因子X盒结合蛋白1抗体
NIR2    膜磷脂转移蛋白1抗体
Neurotensin Receptor 1    神经降压素受体1抗体
Neurotensin Receptor 2    神经降压素受体2抗体
Neurabin 1    神经组织特异性F肌动蛋白结合蛋白抗体
NOTCH1    胞内活化的Notch1蛋白抗体
NCS1    神经钙传感蛋白1抗体
NECAB1    神经元钙结合相关蛋白EFCBP1抗体
NUMBL    膜相关蛋白样蛋白NUMBL抗体
NPEPPS    嘌呤霉素敏感性氨肽酶蛋白抗体
NSF    N-乙基顺丁烯二酰亚胺敏感融合蛋白抗体
NIPAL2    NIPAL2蛋白抗体
Neurotrimin    神经营养因子HNT抗体
Neurexin 1 beta    轴突蛋白1β/Neurexin 1β抗体
NMDAR3A    谷氨酸受体3A抗体
NR3B    谷氨酸受体3B抗体
NMDAR3A + 3B    谷氨酸受体3A+3B抗体
NME6    P53诱导细胞凋亡抑制蛋白α抗体
NT5C1A    胞质5'核苷酸酶1A抗体
NOC2L    NOC2家族样蛋白抗体
Nitrotyrosine    硝基酪氨酸抗体
NUPR1    核蛋白p8抗体
NSPL2    神经内分泌特异性蛋白2抗体
NOX5    还原型辅酶Ⅱ氧化酶5/烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸抗体
Nucleostemin    核干细胞因子抗体(鸟嘌呤核苷酸结合蛋白3)
NPC1    尼曼匹克C1前体蛋白抗体
NET1    去甲转运蛋白/神经递质去甲转运体抗体
NUP88    核孔复合体蛋白88抗体
NOL8    核仁蛋白8抗体
Nck beta    NCK衔接蛋白2抗体
NPHS2    肾小球裂孔膜蛋白PDCN抗体
NMT1    豆蔻酰基转移酶1抗体
Natriuretic Peptide Receptor A    利钠肽受体A抗体
NRG3    神经调节蛋白3抗体
NEDD1    神经前体细胞表达蛋白1抗体
NEK1    丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶NEK1抗体
NAT8L    N-乙酰转移酶8样蛋白抗体
NMS    神经调节肽S抗体
Nocturnin    分子生物钟调控蛋白NOC抗体
Neogenin    神经细胞粘附蛋白NGN抗体
Neuron navigator 1    神经细胞引领蛋白Nav1抗体
Nogo B receptor    轴索过度生长抑制因子B受体抗体
NR0B2    核受体0相关蛋白B家族2抗体
phospho-p95 NBS1 (Ser343)    磷酸化DNA修复蛋白NBS1抗体
样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
3. 样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
结果判断
绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：检测范围1-50ng/mL，检测浓度小于1.0 ng/mL。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月

操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白；预处理后的样本无需稀释，直接取10μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。