文献支持辣根过氧化物酶 9003-99-0

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保质期 ：94656

英文名 ：Peroxidase(POD)辣根过氧化物酶

库存 ：999

供应商 ：北京伊塔生物科技有限公司

CAS号 ：9003-99-0

规格 ：10mg

辣根过氧化物酶 9003-99-0 中文名称：辣根过氧化物酶 CAS:9003-99-0 货号：YT1659 英文名称：Peroxidase(POD)辣根过氧化物酶 品牌：伊塔生物YITABIO 规格：10mg

别名	Donor: hydrogen-peroxide oxidoreductase；Horseradish peroxidase；HRP POD
英文名称	Peroxidase(POD)
CAS	9003-99-0
规格	10mg ; 100mg ; 1g
外观（性状）	褐色结晶性冻干粉状
储存条件	-20℃
有效期	5年
单位	支
酶活/效价	233-300units/mg solid
溶解性	10 mg/mL in water
来源	From horseradish

辣根过氧化物酶 HRP    

货号: YT1659  

规格: 10mg/100mg

英文名称: Peroxidase(POD)

别名: Donor: hydrogen-peroxide oxidoreductase；Horseradish peroxidase；HRP；POD；

CAS: 9003-99-0　 

酶活/效价: >300units/mg solid  

保存条件: -20℃

产品说明:

本产品仅用于科研，不可用于其他。

POD是一种具有氧化还原酶性质的血红素蛋白。用于生化研究，是酶标记法所用的一种主要酶。也用于生物液体中 葡萄糖和半乳糖的测定。

HRP是一种分子量达44 000的糖蛋白，由无色的酶蛋白和深棕色的铁卟啉结合而成，中性糖和氨基糖约占18%，主要有甘露糖、木糖、阿拉伯糖和己糖胺等。每一个HRP分子中含一个氯化血红素IX作辅基，该辅基在403nm波长处有最大吸收峰，而去辅基的酶蛋白在275nm波长处有最大吸收。HRP在403nm的OD值与275nm的OD值之比，也就是所谓的RZ(Reinheits Zahl)值。RZ值仅说明血红素基团在HRP中的含量，并非表示HRP制剂的真正纯度，而且RZ值高的HRP制剂，并不意味着酶活性也高。但可以一纯酶溶液在10mm光径403nm波长下的吸光度来计算酶浓度[1%(W/V)酶溶液吸光度为22.5，浓度为227umol/L]。纯HRP干燥贮存于–20℃可保持稳定，使用1.36mol/L甘油、10mmol/L磷酸钠、30umol/L牛血清白蛋白和20umol/L细胞色素C(pH 7.4)溶液作为基质冷冻保存，可使酶结合物稳定数年。HRP对热及有机溶剂的作用比较稳定，用甲苯与石蜡切片处理或用纯乙醇或10%甲醛水溶液固定做冷冻切片，均不能使其活性改变。或硫化物在10^–5～10^–6mol/L浓度时具有可逆性地抑制HRP的作用；氟化物、叠氮化合物或羟胺仅在高于10^-3mol/L浓度时抑制HRP；HRP还可被羟甲基过氧化氢不可逆地抑制。强酸也是HRP的强烈的抑制剂。

因此，在酶免疫测定常选用上述的某些化合物如、和强酸等作为酶反应的终止剂。此外，在配制酶免疫测定的稀释缓冲液时，为防止酶失活，应避免使用作防腐剂。HRP的同工酶主要可分为三种类型：①含糖量高的酸性同工酶。②等电点接近于中性(或微碱)的含糖量相对较低的同工酶。③含糖量低的碱性(PI>11)同工酶。酶免疫试验中所使用的HRP，以PI为8.7～9.0的所谓“C”同工酶为主要组成成分，其他同工酶的活性则很低。“C”同工酶的共价结构由2个密切接近的区域组成，血红素基团则位于其间而成夹心结构，糖链以8个不同的部位结合于多肽。天然的酶所带的纯电荷极少；无游离的。—氨基，仅有2个可测出的组氨酸，6个赖氨酸似乎全被糖链外壳所遮盖。因此，HRP一般仅有1～2个可用于耦联的氨基。

根据HRP的催化特性，ELISA中一般使用过氧化氢(H₂O₂)作为HRP底物之一，在供氢体(即色原底物)存在时，HRP与H₂O₂的反应迅速而又专一。HRP被H₂O₂二价地氧化形成复合物I，而复合物I又可与氢供体的二步连续的单价相互作用而还原至起始状态。复合物Ⅱ是被氧化的带一个电子的中间产物，当H₂O₂过量，由于复合物Ⅲ或Ⅳ的形成，酶活性受抑制(以后补上)。30％的H₂O₂并不稳定。由于H₂O₂既为HRP的底物，也为其抑制剂，因而ELISA要想得到满意的测定结果，H₂O₂必须限定在一定的浓度范围内，终浓度通常为2～6mmol/L。然而在实际研究工作中，一般很少注意这一点。大多数研究者所使用的H₂O₂的浓度常较理想反应所需的量大2～4倍。吸附于固相的HRP较游离的HRP更易受过量H₂O₂的抑制。如果30%H₂O₂贮存液浓度经测定证实确为30％，则稀释10 000-12 000倍常是较为理想的底物。H₂O₂的摩尔消光系数为10mm光径240nm波长下为43.6，因此，可通过这种方式来检测H₂O₂工作溶液的浓度。

固相ELISA中，当温度高于20℃时，HRP活性常较低，在底物溶液中加入非离子去垢剂聚山梨醇-20或TritonX-100可延迟HRP的失活，且可使反应温度加大，但非离子去垢剂的这种酶活性保护效应依氢供体的不同而有差异。如以2,2’-联氮-双-[3-乙并噻唑啉]-6-磺酸(ABTS)为氢供体，则只能保护20%的酶活性，而以邻联茴香胺(ODA)为氢供体时，酶活性的保护提高至90%。

HRP之所以是迄今为止在ELISA中应用最为广泛的标记用酶，主要是因为其一方面易于提取，价格相对低廉；另一方面性质稳定，耐热及有机溶剂的作用，与抗原或抗体偶联后，活性很少受损失

注意事项:

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

说明：POD是一种具有氧化还原酶性质的血红素蛋白。用于生化研究，是酶标记法所用的一种主要酶。也用于生物液体中 葡萄糖和半乳糖的测定

 

产地	中国
厂家	北京伊塔生物科技有限公司
联系人	刘欣

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