文献支持MTT噻唑蓝 298-93-1

保存条件 ：ITTABIO

保质期 ：3年

英文名 ：MTT噻唑蓝

库存 ：55

供应商 ：北京伊塔生物科技有限公司

CAS号 ：298-93-1

规格 ：250mg

MTT噻唑蓝 298-93-1 MTT噻唑蓝 298-93-1 名称：MTT噻唑蓝 298-93-1 MTT噻唑蓝 298-93-1 货号：YT1468 英文名称：MTT噻唑蓝 品牌：伊塔生物 CAS:298-93-1 规格：250mg，纯度≥98%分子式：C₄₂H₇₂O_14，分子量：801.01，溶解性：DMSO，鉴定方法：液相，性状：白色粉末，熔点：194-197℃，密度：1.33g/cm3，保存条件：2-8℃ 避光，运输料件：2-8℃，保质期：3年，产地：中国，类别：生化试剂，库存：23，用途：仅用于科研实验  Phosphodiesterase I 使用方法： 参考官网：ittabio.com 
实验方法
1 选择适当的细胞接种浓度，一般情况下，96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴路后面积差异很大，因此，在进行MTT试验前，要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线，确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间，以保证培养终止致细胞过满。这样，才能保证MTT结晶形成酌量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低，大少观察不到差异。
2 药物浓度的设定。一定要多看文献，参考别人的结果再定个比较大的范用先初端。根据自己初筛的结果缩小浓度和时间范围再细筛。切记!否则，可能你用的时间和浓度根本不是药物的有效浓度和时间。3时间点的设定。在不同时间点的测定OD值，输入exce康，最后得到不同时间点的抑制率变化情况，画出变化的曲线，曲线什么时候变得平坦了 (到了平台期) 那个时间点应该就是很好的时间点4 培养时间。200ul的培养液对于10的45次方的增殖期细胞来说，很准维持68，如果营养不够的话，细胞会由增殖期渐渐趋向G0期而趋于静止，影响结果，我们是在48h换液的。
5 MTT法只能测定细胞相对数和相对活力，不能测定细胞绝对数，做MTT时，尽量无菌操作，因为细菌也可以导致MTT比色OD值的升高。
6 理论未必都是对的。要根据自己的实际情况调整。
7实验时应设置调季孔，对照孔，加药孔。调委孔加培养基、MTT、二甲基亚讽。对照孔和加药孔都要加细胞、培养液MTT、二甲基亚讽，不同的是对照孔加溶解药物的介质，而加药组加入不同浓度的药物。8 避免血清干扰。用含15%胎牛血清培养液培养细胞时，高的血清物质会影响试验孔的光吸收值，由于试验本底增加，会试验敏感性。因此，一般选小于10%胎牛血清的培养液进行。在呈色后，尽量吸净培养孔内残余培养液。
MTT 溶液的配制方法通常，此法中的MTT 浓度为5mg/ml，因此，可以称取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中，用0.22um滤膜过滤以除去落液里的细菌，放4° 避光保存即可。在配制和保存的过程中，容器 好用铝落纸包住，需要注意的是，MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力，但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候，为了保证实验结果的线性，MTT 吸光度 好在0-0.7 范围内
MTT一般现用现配，过减后4°C避光保存两周内有效，或配制成5mg/ml保存在-20度长期保存，避免反复冻融，好小剂量分装，用避光袋成是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解，我一般都把MTT粉分装在EP管里，用的时候现配，直接往培养板中加，没必要一下子配那么多，尤其当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用了。MTT有致癌性，用的时候小心，有条件带那种透明的簿膜手套,配成的MTT需要无菌，MTT对菌很敏感;往96孔板加时不造光也没有关系，毕竟时间较短，或者你不放心的时候可以把操作台上的照明灯关掉配制MTT时用用PBS溶解，也有人用生理盐水配，60%C水浴助溶PBS配方
Nacl 8g
Kcl 0.2g
Na2HPO4 1.44g
KH2PO4 0.24g
调pH 7.4
定容1L
MTT用途及原理
MTT主要有两个用途:
1.药物(也包括其他处理方式如放射线照射)对体外培养的细胞毒性的测定2.细胞增殖及细胞活性测定.
MTT原理:
检则原理为活细胞线粒体中的确珀酸脱氨酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝色结晶用(Formazan) 并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚讽(DMSO)能溶解细胞中的甲费，用酶标仪在490nm波长处测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值(OD值)，来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强如果是测药物毒性，则表示药物毒性越小)
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产地	中国/进口
厂家	北京伊塔生物科技有限公司
联系人	刘欣
电话	13321108309
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	2460994656

北京伊塔生物是一家致力生化试剂,细胞，细胞培养，分子生物，标准物质，Elisa试剂盒，生化检测试剂盒，微生物培养基，小分子抑制剂，各种动物血清血浆抗凝全血等产品。质量优、供货量大、价格优惠，尤其对长期合作的代理商，提供极具竞争优势的折扣价。生化试剂产品提供数万种现货，发货及时，价格有优势，欢迎洽谈。公司产品种类齐全，库存量充足，旨在为全国乃至于世界各地科研机构、工业、电子、医疗、科技等领域的客户，提供系统的产品资源及配套技术服务。磷酸二脂酶 9025-82-5  Phosphodiesterase I结构式：/
注意事项：本产品仅用于科研实验，不可用于临床 
使用说明：参考官方网站
官方网站：www.ittabio.com
订货商城：www.ittabio.com
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